胃癌中microRNa-200家族表达和其功能得研究.pdfVIP

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2017-09-04 发布于江苏
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胃癌中microRNa-200家族表达和其功能得研究.pdf

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中文摘要两组之间比较均有统计学意义(尸O．05)。通过OD值计算细胞抑制率， miRNA．200c 表明胃癌细胞内miRNA．200c表达水平的上调可抑制胃癌细胞的增殖。果显示：细胞转染48小时后，miRNA．200cmimics实验组的G0／G1期、 18．36M．29％， S期和G2／M期的比例分别为72．77+0．85％、8．87+0．45％矛D 0+0．80％、43．57士1．27％和而阴性对照组三期的比例分别为42．1 GO／G1期细胞向S期进展。果显示：转染24小时后，miRNA．200cmimics实验组镜下细胞迁移宽度为344．404-1 1+18．2 7．249m，而阴性对照组为270．51岬，两组之间比较有于阴性对照组。结论： 1 AGS中均存在不同程度的表达下调，与胃癌组织结果相一致。 2miRNA．200c SGC790 1细胞中miRNA．200c的表达水平。 3 miRNA．200c可能参与了细胞增殖的分子调控，有望成为胃癌治疗新的靶标。 4 4 中文摘要来抑制细胞增殖。 5 力。提示miRNA一200c的表达水平可影响肿瘤细胞的迁移能力，为进一步研究胃癌治疗新的靶标提供了依据。第三部分microRNA．200c靶基因的筛选和验证 miRNA．200c的分子机制奠定基础。方法：应用生物信息学软件对miRNA．200c的靶基因进行预测和筛选，同时采用双荧光素酶报告基因法对预测的靶基因进行验证。结果： 1 近年来备受关注的RhoE基因(NM005168)作为进一步研究目标，分析发对此序列构建报告载体，进行双荧光素酶报告基因系统实验验证。们应用验证靶基因与miRNA最经典的方法“双荧光素酶报告基因系统’’ RhoE 3’UTR和突变型RhoE 分别共转染RhoE3UTR+miRNA．200cmimics、RhoE NC、RhoErout3’UTR+miRNA．200cmimics和RhoErout3’U呵R+ miRNA．200c NC分为四个实验组，48h后的检测结果显示：只有RhoE 3’UTR+miRNA．200c mimics组荧光素蛋白的表达水平显著降低俨O．05)，说明miRNA一200c可靶向抑制RhoE3’UTR报告基因的活性。但 miRNA一200c对RhoEmut NC对RhoE3’UTR和RhoEmut3’UTR的表达载体均没有抑制作用 miRNA．200c对RhoE存在抑制性功能的作用。中文摘要结论： miRNA。200c可靶向抑制RhoE 3’UTR报告基因的活性，验证了RhoE 作用，可能通过抑制RhoE发挥其生物学功能，从而影响着胃癌的发生、分子机制奠定了基础。关键词：miRNA．200家族；胃癌；生物学功能；生物信息学；靶基因 fa microRNA-200mily of functions on and The expressions study in cancer gastric