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β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明 产品简介： β-半乳糖苷酶染色试剂盒 (β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时 SA- β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织 进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。 绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力，在不能分裂后就进入衰老状态。此时细 胞仍然是存活的，但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老细胞不能在一些常 规的刺激下再诱导细胞分裂，并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊，不同于一些损伤 诱导的细胞休眠，也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞通常体积变会大，表达 pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式，同 时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可 以用于组织切片的衰老检测。 β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal 为底物，在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会 生成深蓝色产物，光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。 本试剂盒仅染色衰老细胞，对衰老前的细胞(presenescentcells)、静止期细胞(quiescent cells)、 永生细胞 (immortal cells)或肿瘤细胞 等不会染色。 对于组织切片或组织块， 可以检测的样品数量视样品的大小而定，对于普通的切片也至少足够检测 100 个样品，使 用 6 孔板测定，足够测定 100 个样品。 产品组成： 编号 名称 G1580-100T Storage 试剂 β半乳糖苷酶染色固定液 100ml ℃ (A): - 4 试剂(B): X-Gal 溶液 5l m -20℃ 避光 试剂(C): β-半乳糖苷酶染色液A 1ml 4℃ 避光 试剂 β半乳糖苷酶染色液 1ml ℃ 避光 (D): - B 4 试剂 β半乳糖苷酶染色液 100ml ℃ 避光 (E): - C 4 使用说明书 1 份 自备材料： 1、PBS 或 HBSS 2、细胞培养器皿 3、显微镜 操作步骤 (仅供参考) ： (一)贴壁细胞染色： 1、对于 6 孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用 PBS 或 HBSS 洗涤 1 次，加入 1ml β-半乳糖苷酶染色固定液，室温固定 15min。对于其它类型的培养板，固定液及后续溶液 的用量参照此比例进行操作。 2、吸除细胞固定液，用 PBS 或 HBSS 洗涤细胞 3 次，每次 3min。 3、吸除 PBS 或 HBSS，每孔加入 1ml 染色工作液。使用聚丙烯(polypropylene)容器， 不能使用聚苯乙烯(polystyrene)容器配制染色工作液。染色工作液的配制方法参考表 1。 β-半乳糖苷酶染色液A 10 μl β-半乳糖苷酶染色液A