抑制羟自由基的胁迫粟水溶性蛋白分离纯化与性质研究.pdfVIP

14 粮食与油脂 2008年第 11期 抑制羟自由基的胁迫粟水溶性蛋白 分离纯化与性质研究 李景军 ，陈正行 ，徐宝才 ，任发政 3，罗云波 3，王长存 1 (1．雨润集团技术中心，江苏南京 210041；2．江南大学食品学院， 江苏无锡 214122； 3．中国农业大学食品科学与营养工程学院， 北京 100083) 摘 要：对粟胁迫蛋 白进行进一步研究，采用色谱法对其分离纯化；实验得到两个强抑制羟 自由基 作用的活性蛋白，相对分子质量为 l1084和 l1136；纯度均达90％以上，抑制率分别为72．9％和 68．3％。 关键词：水溶性蛋白；粟；羟 自由基 ；蛋 白纯化 nJ}，U…n．!nC一a一tl!0一n．一a．nd1ch。aracteriz‘ati0‘n0IItih‘yd一roxy一lrad一ic‘a一li●nn■…ibiti一ng water—s0lubleproteinfrom stressmillet LIJing-juna。CHENZheng-xing2，XUBao-cai1,RENFa-zheng3，LUOYun-bo。WANGChang—cun (1．TheRDCentreofYurunFoodGroupCo．，Ltd．。JiangsuNanjing210041。China； 2．SchoolofFoodScienceandTechnology，Jiangnna University，JinagsuWuxi214122，China； 3．SchoolofFoodScienceandNutritionEngineering，ChinaAgricultureUniversity，Beijing100081。China) Abstract：ThisisafurtherresearchontheHydroxylRadicalInhibitingwater—solubleproteinfrom stress milletbychromatographanalyzingmethod．Twokindsofhigherhydroxylradicalinhibitingactivity stressproteinwasobtained：therelativemolecularweightwas11084and11136，andtheinhibitionrate upto72．9％and68．3％，respectively．Thepuri助ngdergeesofavailablesrtessproteinwereover90％． KeyW ords：water—solubleprotein；srtessmillet；hydroxylradical；purificationofprotein． 中图分类号：TS210．21 文献标识码：A 文章编号：1008--9578(2008)l1—0014～04 萌发可使谷物营养价值和生理活性得以提高，产 1．2．3离子交换色谱 生多种对人体有益功能因子 ¨吲 ，而胁迫萌发会使谷 样品：浓度为 lmg／mL胁迫粟粗品液；色谱柱： 物种子产生活性应激蛋白 。羟 自由基是三类 自由基 3×40cm开管玻璃柱，QSepharoseBigBeads(Pharma- 中对组织细胞毒害很大一类 自由基，其抑制物能延缓 ciaBiotech公司)填料 ；流动相：pH8．6Tris一盐酸缓 或抑制、修复或防御 自由基对靶分子细胞氧化损伤 ； 冲液；检测波长：220rUTI；流速：3ml／min；温度：室温 ； 而胁迫萌发后粟水溶性蛋白对羟 自由基抑制作用更为 纸速：2．5cm／h；灵敏度：lA；上样量：10ml。 显著 。本实验以粟胁迫蛋白为研究对象，利用凝胶过 1．2．4凝胶过滤色谱 滤色谱、离子交换层析色谱和疏水相互作用层析色谱