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江西农业学报 2008，20(10)：1～3 AetaAgriculturaeJiangxi 兔 CCR9基因的克隆与序列分析 贾海丽，惠参军，乔新安，韩立强，王月影，王艳玲，杨国宇 (河南农业大学动物生理生化实验室，河南郑州450002) 摘 要：设计 l对克隆引物，从兔十二指肠黏膜组织提取总RNA，进行RT—PCR，将PCR产物与pMD19一T载体连接后转 化EcoliJM109感受态细胞，检测阳性克隆、测序并进行序列分析。结果表明：克隆的兔CCR9基因长为624bp，编码由208个 氨基酸残基组成的CCR9前体蛋 白，预测CCR9具有多个跨膜区。克隆的兔CCR9基因与绵羊、人的同源性分别为82．9％、 82．7％；推导的兔CCR9氨基酸序列与绵羊、人的同源性分别为80．1％、82．2％，其结构特征与绵羊、人的相一致。 关键词：兔；CCR9基因；克隆；序列分析 中图分类号：S829．1 文献标识码：A 文章编号：1001—8581(2008)10—0001—03 MolecularCloningandSequenceAnalysisofGeneCCR9inOryctolaguscuniculus JIAHai—li，HUICan—jan，QIAOXin—na，HANLi—qinag，WANGYue—ying，WANGYan—ling，YANGGuo—yu ‘ (CollegeofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine，Henna AgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China) Abstract：A pairofcloningpriinersweredesired，totalRNA wage~metedfrom theduodenum muco6altissueofOryaot．~ an．／／c- u／ns．andmRNA sequenceWag amplifiedbyRT—PCR．rI11ePCRproduaswereligatedintothepMD19一Tvector，andhtentransformed intocompetentceilsofE colJM109．田lepositivecloneWag identifiednadtheseq1．1enoc wag testednadnaalyzed．Theresultsindicate tl1atgeneCCR9inOryctolagns cuniculushashtelengthof624bpnadencodes208aminoacids．TertiarysturcturepredictsthatCCR9con- taiIISseveraldomai．s．IdentityanalysisshowsthattheCCR9nucleotideseql／enoc in 伽 cun／cu／usshares82．9％ ，82．7％ homolo- gYwiht thatofOv／sareisnadHomosapeinsrespcetively，nadthepredictedaminoacidseqalenoc of CCR9inD cun／cu／usshares 80．1％ ，82．2％ homologywiththatofOvisaries，Homo sapiensrespectively，revealingthatthestructuralfeatureofhtefomr erCCR9is consistentwiththelattertwoCCR9s． Keywords：Oryctolagns cuniculus；GeneCCR9；Molceularcloning；Sequencenaalysis 趋化因子是一系列结构相似、有20％～70％氨基酸 等(2007)克隆了羊 CCL25及其受体CCR9，并研究了它 同源性且能控制免疫细胞做定向迁移的小分子细胞因子 们在黏膜免疫组织中的表达 。目前，这种趋化因子受 超家族，与感染、白细胞运输和免疫细胞分化的调节有 体已经从不同物种独立克隆出来，尚未见兔 CCR9基因 关，在多种炎I生疾病中起重要作用 ．。它们通过结合特异 的相关研究。笔者利用人ESTs拼接
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