三羟基异黄酮对APP695基因转染PCI2细胞Bax和Bel-2蛋白表达的影响.pdfVIP

医学与脑科学杂志2013年9月第 鲞筮 望ehdv‘ 旦堕 !P Q ： ： ： · 791 · · 基 础 研 究 · 三羟基异黄酮对 APP695基因转染 PC12细胞 Bax和 Bcl一2蛋 白表达 的影响 丁振 禹 赵翠香 王凤斌 刘冰 谭春艳 王亚南 【摘要】 目的 观察植物雌激素三羟基异黄酮(genistein，GST)对APP695基因转染PC12细胞Bax和 Bcl-2蛋白表达 的影响。方法 用 pIRES2一EGFP空载体和 plRES2一EGFP／APP695MT表达载体转染正常 PC12细胞，将细胞分为正常对照组 、空载转染组 、APP695转染组和 GST干预组 (5txmol／L、15IxmolfL)。 采用免疫细胞化学SABC法和免疫印迹法检测凋亡相关蛋 白Bax和 Bcl-2在 PC12细胞中的表达。结果 免疫细胞化学SABC法结果显示，与正常对照组比较，APP695转染组PC12细胞 Bax蛋 白细胞阳性表达率 显著升高[(78．02±1．26)％，P0．01)]，Bcl一2蛋白细胞阳性表达率则明显降低 [(15．40±0．72)％，P 0．O1)]；15Ixmol／LGST组与 APP695转染组 比较，Bax蛋 白的阳性细胞表达率显著 降低 [(22．35± 0．49)％，P0．01)]，而Bcl一2蛋白的阳性表达率明显增强[(68．11±0．24)％，P0．01)]。Westernblot 结果表明，APP695转染组与对照组比较Bax蛋白的表达量明显增多，Bcl一2蛋白表达则明显降低；GST各处 理组与APP695转染组比较，Bax蛋白的表达量明显降低，Bcl一2蛋 白表达显著增强。结论 GST能降低 APP695基因转染引起的PC12细胞内Bax蛋白表达的水平，而提高Bcl一2蛋白的表达水平，对PC12细胞产 生保护作用。 【关键词】 三羟基异黄酮；APP695；Bax蛋白；Bcl-2蛋白；PC12细胞 Effectofgenistein on the expression ofBax and Bcl-2 protein in PC12 cellstransfeeted with mutant APP695type D1NG Zhen—yu，ZHAO Cui—xiang，WANG 一bin，L1U Bing，TAN Chun—yan，WANG Ya—nan． ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine，Shanghai200025，China 【Abstract】 Objective ToinvestigatetheeffectofgenisteinontheexpressionofBaxandBcl-2proteinin PC12cellstransfected with mutantAPP695Type．M ethods PC12 cellsweretransfected with pIRES2一EGFP plasmidorplRES2-EGFP／APP695MT expressionplasmid，andthen dividedinto normalcontrolgroup，Unladen group，APP695transfectedgroup，GSTtreatmentrgoup(5Ixmol／L，15~mol／L)．TheBaxandBcl-2proteinex— pressioninPC12 cellswasmeasuredbyImmunoeytochemistrySABC andWestern—blot．Results Immunocyto— chemistrySABC showedthat：comparedwiththenomr alcontrolgroup，theexpressionofbaxprotein inAPP695 transfectedrgoupwasstronglyincreased((78．02±1．26)％，P0．01))andtheexpressionofbcl-2proteinwas veryweakoppositely((15．40±0．72)％，JP0．01))．ComparedwithAPP695transfectedrgoup，theexpre