高效液相色谱法测定乳酸菌中的γ-氨基丁酸.pdfVIP

324 2008,Vo1．29,No．06 艮 品科 孛 ※分析检测 高效液相色谱法测定乳酸菌中的Y一氨基丁酸 葛菁萍，蔡柏岩，宋明明，凌宏志，宋 刚，平文祥 (微生物黑龙江省高校重点实验室，黑龙江大学生命科学学院，黑龙江 哈尔滨 150080) 摘 要：建立了邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法。定量测定短乳杆菌中Y一氨基丁酸的方法，为进一步研究乳 酸菌中的v一氨基丁酸奠定了方法基础。在对浓缩发酵上清液柱前衍生后，利用Nova2pakC,~色谱柱，以50mmol／L 的乙酸钠(pH6．8)一甲醇一四氢呋喃(A相，82：17：1；B相，22：77：1，VlV)为流动相进行梯度洗脱，可以检测到痕量 v一氨基丁酸(2．2mg／100g)。精确度和回收率实验表明，该方法可以用于痕量v一氨基丁酸的检测。 关键词：高效液相色谱法；邻苯二甲醛；v一氨基丁酸；乳酸菌 Determination of V—Amino Butyric Acid in Lactobacillus brevis Fermentation Liquid by HPLC GE Jing—ping，CAI Bai—yan，SONG Ming—ming，LING Hong—zhi，SONG Gang，PING Wen—xiang (Key Laboratory of Microbiology，College of Life Science，Heilongjiang UniVersi哆，Harbin 150080，China) Abstract：High performance liquid chromatography with o-phthaldialdelhyde pre-colomn derivatization was used to determine the content of Y—amino butyric acid(GABA)in Lactobacillus brevis．After pre-colomn derivatization of concentrated fermentation supematant，separation of GABA Was carried out on Nova2pakC18 column with the gradient elution of 50 mmol／L acetate sodium(pn6．8)，methanolandTHF(solutionA 82：17：1；solutionB 22：77：1，V，v)．The resultsofaccuracyand recovery rate showedthatthismenthod Can beusedtOdetecttrace contentofGABA． Key words：HPLC：o-phthaldialdelhyde；GABA；lactid acid bacteria 中图分类号：0657．72；TQ922．9 文献标识码：A 文章编号：1002—6630(2008)06—0324—03 v一氨基丁酸(v．amino butyric acid，简称GABA， 低，故常采用衍生后再测定的方法。 也称氨酪酸)是一种重要的功能性非蛋白质氨基酸，作 本课题组从乳酸酸菜发酵液中分离出一株短乳杆 为中枢神经系统重要的抑制性神经递质，能通过突触后 菌，其发酵液经氨基酸分析仪检测，可产生GABA， 膜超极化、减少离子内流和降低细胞代谢等机制，使 但含量较低(2．2mg／100g)。因此，本研究利用GABA与 得神经元处于保护抑制状态。大量的研究已经表明， 衍生化试剂邻苯二甲醛(OPA)反应生成具有较强荧光活性 GABA具有增进脑活力和长期记忆、安神抗抑郁、调 衍生化产物的原理，采用柱前衍生高效液相色谱法来检 节激素分泌、改善脂质代谢、降血压、治疗癫痛和改 测该乳酸菌发酵液中的痕量GABA，为进一步通过育种 善更年期综合症等重要的生理