三叶青脂溶性提取物对A375细胞增殖及黑色素合成的影响.pdfVIP

时珍国医国药2012年第23卷第4期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2012VOL．23NO．4 2mg／ml，分别下降了38．8％，48．6％和38．2％。虽然各生物碱 泛函理论研究 【J]．分子科学学报，2008，24(3)：216． 含量也均有下降，但都没有与甘草配伍煎煮后的效果好。附子与 [2] 李永勤．从陕西省周至县人喜食附子谈附子毒性的监制及安全应 甘草同时煎煮炮制后，乌头碱含量降低量约为不加甘草时减少量 用之法 [J]．北京中医，2006，25(12)：743． 的两倍。 [3] 何 军，祝 林，奉建芳．附子总生物碱含量测定方法 比较 [J]．现 代 中药研究与实践，2003，17(6)：2O． 可见，研究结果很好地解释了周至人食用附子加入甘草的科 [4] 张化为，冯改利，王 薇，等．不同煎煮时间对附子总生物碱的影响 学性和很少中毒的原因。尽管如此，但附子始终是大毒之物，为 及其指纹图谱研究[J]．陕西中医学院学报，2010，33(4)：100． 确保安全起见，食用前应该保证足够的煎煮时间和温度。 [5] 龙沛霞，王玉珍．一阶导数紫外分光光度法测定制川乌、制草乌、附 参考文献： 子中生物碱含量 [J]．中草药，1996，27(9)：531． [1] 洪 波，仇永清．附子中双酯型乌头碱类成分水解减毒机理的密度 三叶青脂溶性提取物对 A375细胞增殖 及黑色素合成的影响 丁 丽，纪其雄 (浙江医药高等专科学校，浙江 宁波 315100) 摘要：目的探讨三叶青三氯甲烷提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。方法 采用MTT比色法，测定不同浓度三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞体外抑制作用；比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素 含量；采用光学显微镜法观察其对细胞形态的影响。结果 三叶青三氯甲烷提取物在6—500 g／ml浓度范围内对A375 细胞增殖有显著的抑制作用(P0．01)，且呈时间一剂量依赖性；浓度小于50 ml时，对酪氨酸酶活性和黑色素合成 抑制有增加趋势；在 100～5oowg／ml时，对A375肿瘤细胞有较强的抑制作用；光学显微镜下可见典型凋亡细胞形态学改 变。结论 三叶青三氯甲炕提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成具有抑制作用。 关键词 ：三叶青； A375细胞； 细胞增殖； 酪氨酸酶； 黑色素合成 D0I标识 ：d0i：10．3969／．issn．1008-0805．2012．04．080 中图分类号：R284．2 文献标识码 ：B 文章编号：1008-0805(2012)04-0962—02 三叶青为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤 Tetrastigmatis 1．2 药物 三叶青饮片，用95％乙醇回流提取3次，1h／次，60％ hemsleyaniDielsetGilg，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功 乙醇乙醇回流提取3次，lh／次，合并提取液，过滤，减压浓缩得乙 效，在浙江地区应用非常广泛 ，在民间常被用来治疗 D／JL惊厥高 醇浸膏，用少量水将 乙醇浸膏分散 ，用三氯 甲烷萃取，回收溶剂 热、肺炎 、支气管炎、咽喉炎、痢疾、肝炎、病毒性脑膜炎、瘰疬、痈 后，得到三氯甲烷萃取物。临用前用 1mlDMSO溶解，含 10％ 疔疮疖等症 。近年来，人们发现三叶青可抑制肿瘤细胞的增 (体积分数)灭活新生小牛血清RPMI一1640培养液稀释，无菌过 殖和诱导其凋亡 。本课题组在前期实验中发现，--nt青的三 滤备用。 氯甲烷提取物对体外培养的人恶性黑色素瘤细胞 A375表现 出 1．3 细胞株 人