三氧化二砷诱导人肺腺癌细胞凋亡形态学及数量变化.pdfVIP

堕 Q 生4旦 第25卷第4期 clinicalMisdiaosisMistherapv，V01．25，N0．4ADril2012 · 59 · 三氧化二砷诱导人肺腺癌细胞凋亡形态学及数量变化 纪子钊，赵俊刚，鲁继斌 [摘要] 目的 观察三氧化二砷(arsenictrioxide，AsO，)诱导人肺腺癌 A549细胞增殖和凋亡 的形态学改变及计 数变化 。方法 体外培养 A549细胞至对数生长期后 随机分为实验组和空 白对照组 。实验组加入 AsO 药液 ，光学显微 镜 (光镜)和电子显微镜 (电镜)扫描观察细胞凋亡情况 ，使用流式细胞仪定量计数凋亡细胞 比例变化 ，并与空 白对照组 比较 。结果 实验组 A549细胞光镜下表现为细胞缩小、变 圆，透光度降低 ，胞体呈空泡样改变 ；经吖啶橙荧光染色后 ，贴 壁细胞荧光强度降低 ，密度下降，部分细胞破碎 、胞核消失 ，出现凋亡细胞 ；电镜下可见细胞核固缩、破裂 ，无核膜包被 ，核 染色质边集胞膜 ，出现凋亡小体 。计数结果表 明，实验组凋亡细胞比例 (14．497％)明显多于空白对照组(0．027％)，差异 有统计学意义(x=18．447，P0．0001)。结论 经As0 诱导后 ，A549细胞发生了明确的增殖和凋亡改变，且凋亡细 胞计数增加 ，故 As0，有可能成为临床治疗肺癌 的一种新方法 。 [关键词] 肺肿瘤 ；三氧化二砷 ；A549细胞 ；细胞凋亡 [中国图书资料分类号 】 R734．2 [文献标志码] A [文章编号] 1002—3429(2012)04．0059—02 [DoI] 10．3969／i．issn．1002—3429．2012．04．027 Observation oftheCellM orphologyChangeandCountNumberChangeoftheA549CellsUndertheArsenicTrioxide (As，0 )Induction JIZi—zhao，ZHAOJun—gang，LUJi—bin(DepartmentofThoracicSurgery，ShengjingHospital，ChinaMedicalUniversity，Sheny— ang110004China) [Abstract] 0bjective Toobservethecellproliferation，morphologychangeandcountnumberchangeoftheA549cells underthearsenictrioxide(As2O3)induction．Methods TheA549cellswereculturedintologarithmicgrowthphaseinvitro， and theCellsweredividedintoexperimentalgroup andblankgroup．As2O3wasaddedintoexperimentalgroup，theapoptosissta- tusofthecellswasobservedunderlightmicroscopeandbyelectronmicroscopescanning．Theflow cytometerwasused tocount thecellnumberandcalculatethechangeoftheapoptosisratio．Results Underthelightmicroscope，theexperimentalgroup cellsweredeflated，andturned intoacircle，thetransmissivity decreased，and thevacuoluschangesweredetected in thecell body．Afterfluorescentstainingbytheacridineorange (AO)，thefluorescenceintensityanddensityoftheattachedcellsde— creased，partofthecellsbrokeapart，nucleidisappeared，and thecellapoptosisappeared．Undertheelectronmicroscopewe saw karyopyknosis，karyorrhexis，losenuclearmembrane，chromatinmargina