联合X-连锁基因多个多态性位点采用逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析.pdfVIP

史堡鱼渲堂盘查!Q!!生!旦筮!!鲞筮!塑g!垫!旦!坐型!!：垒P堕!!Q!!：!!!：!!：盟!：兰 ·26l· ·论著· 联合x一连锁基因多个多态性位点采用 逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析 刘柳马晓瑭王婕好 苏涛杨琳徐泽锋秦铁军 肖志坚 【摘要】 目的探索中国正常女性x一连锁葡萄糖6一磷酸脱氢酶(G6PD)、P55、BTK、FHL一1基因 外显子多态性位点的杂合子基因型频率，并探讨应用以上位点采用基于X染色体失活克隆性检测法一 逆转录检测法进行造血细胞克隆性分析的价值。方法采集446名中国正常女性外周血标本，提取基 因组DNA，应用等位基因特异性PCR或PCR一限制性片段长度多态性方法分析x一连锁G6PD、P55、 BTK、FHL一1基因外显子多态性位点的杂合基因型频率。以上述杂合位点作为克隆性分析的标记，采 用逆转录检测法分析有JAK2V617F突变或克隆性染色体异常的原发性血小板增多症(ET)女性患者 造血细胞的克隆性。结果446名中国正常女性G6PD基因杂合基因型频率为12．8％(57例)，P55基 因杂合基因型频率为29．4％(131例)，BTK基因杂合基因型频率为52．0％(232例)，FHL一1基因杂合 基因型频率为46．4％(207例)。4个多态性位点中具有至少1个杂合位点的正常女性占81．4％ 检测法进行造血细胞克隆性分析，所有患者均为单克隆／寡克隆。结论基于x染色体失活的克隆性 检测法一逆转录检测法可用于约80％中国女性患者的克隆性分析。 【关键词】 连锁不平衡；多态性，单核苷酸；克隆排除；血小板增多 Determinationof detectionof X-linkedexonic 10- hematopoieticclonalityby multiple gene polymorphic ci LIU usingtranscription—basedclonalityassays Liu，MAXiao—tang，WANGJ娩一yu．SUTao，YANG andBloodDiseases Lin，XUZe-feng，QINTie和凡，XIAOZhi-jian．InstituteofHematology Hospital，State KeyLaboratoryofExperimentalHematology，CAMSPUMC，Tianjin300020，China author：XIAO Corresponding Zhi-fian，Email：疵iao@hotmail．com To the of inX—linked 【Abstract】Objective G6PD，P55，BTK， explorefrequenciesheterozygosity andFHL一1 exonic loci Chinesefemalesandthevalueofdeterminationof gene polymorphicamong hematopoi— etic detectionoftheseX--chromosomeexonic basedonX·-chromosomeinactivation clonalityby polymorphisms GenomicDNAwasextractedfrom patterns(XCIP)一transcription—basedclonalityassays(TCA)．Methods bloodof446Chinese PCR—restriction pe