羟甲香豆素荧光猝灭法测定羟自由基产生量及常见食品水提物羟自由基清除率测定的研究.pdfVIP

2009年3月 内蒙古大学学报(自然科学版) Mar． 2009 JournalofInner V01．40No．2 第40卷第2期 MongoliaUniversity 文章编号：1000一1638(2009)02。0167—06 羟甲香豆素荧光猝灭法测定羟自由基产生量及 常见食品水提物羟自由基清除率测定的研究’ 刘 颖1“，冯金朝1，周珊珊1，王宁波1 (1．中央民族大学生命与环境科学学院，北京100081； 2．内蒙古师范大学化学与环境科学学院．呼和浩特010022) 摘要：在pH10．17NH3一NH．cI缓冲介质中，利用Mn2+-H：02体系产生的羟自由基对羟甲香 豆索荧光强度的猝灭，确立了荧光法测定羟自由基产生量的新体系；用抗坏血酸作羟自由基清 除剂．测定其清除率。结果表明抗坏血酸对·OH的清除作用具有明显的量效关系；同时用羟 甲香豆素荧光猝灭法实测了常见食品桃、橙子、芹菜、茄子等10种新鲜水果和蔬菜水提物对 ·OH的清除率，其大小顺序为桃橙子香蕉草莓芹菜茄子苹果西红柿黄瓜 梨．由此建立了测定羟自由基清除率的新方法．该方法具有较好的稳定性和灵敏度． 关键词：羟甲香豆素；荧光猝灭法；食品；羟自由基清除能力 中图分类号：0657．3文献标识码：A 生物体内的氧化过程可提供机体所需的能量，同时也相应的产生各种氧自由基(单线态氧，超氧 ·OH的反应活性最强，对机体危害最大，几乎可以和所有的细胞组分(核酸、蛋白质和脂质等)发生 反应∞，破坏酶、透明质酸及产生过量的过氧化脂质自由基，导致炎症、引起诱发突变o)．近年来对自 由基与衰老，自由基损伤与疾病，自由基的调控与平衡，自由基检测技术等方面的研究已成为热点“’， 其中自由基检测技术的深入研究带动了与之相关的科研工作的深入和发展，这对于进一步探讨自由 基损伤的治病机理及筛选、评价具有清除羟自由基能力的生化药品、保健食品以及对天然抗氧化营养 物质的开发利用具有重要意义． 常见的抗氧化物质有超氧化物歧化酶(SOD)、维生素C、维生素E、p胡萝卜素、硒、锗等．其中 SOD是生物体内重要的抗氧化酶，是清除自由基的首要物质．SOD在生物体内的水平高低意味着衰 老与死亡的直观指标。3．维生素C对机体运动作用有影响∞’，维生素E是细胞膜内重要的抗氧化物和 膜稳定剂∽．硒是机体抗氧化系统组成成分谷胱甘肽过氧化物酶的必需成分∞3．肛胡萝卜素是维生素 a的前体，具有清除自由基的功能。)，番茄红素是近年必威体育精装版发现的一种强抗氧化剂，它属胡萝卜素类 物质n∞．辅酶Q是物质氧化产生能量过程中氧化磷酸化呼吸链的电子传递体，它可减少人心脏和肌 肉自由基生成n”． 长期使用化学合成的抗氧化剂对人体有一定的副作用，目前国内一些运动保健饮(食)品，如沙棘 制剂、弥猴桃汁、酸枣汁等具有抗氧化作用n幻．因此，寻找天然、安全、无毒的抗氧化剂越来越受到人 ·收稿日期：2008—07—14；修回日期：2008—10—22 基金项目：国家自然科学基金资助项目，中央民族大学“985工程”项目资助(CUN985—3—3)，中央民 族大学。211工程”项目资助(Muc021211306)．内蒙古自治区自然科学基金资助重点项目 (200711020202)，内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJ06108) 作者简介：刘颖(1963～)，河南省新安县人，教授．博士．研究方向：环境及药物分析化学． 内蒙古大学学报(自然科学版) 们的重视． 离体羟自由基检测方法有电子自旋共振法n∞、化学发光法㈨、吸光光度法n5’和荧光分析法n∞ 等．由于荧光分析法具有灵敏性高、准确度好等优点，已成为羟自由基检测的主要方法n7叫们，它通常 MU)作为指示剂研究测定羟自由基产生量的方法，并实测抗坏血酸和常见食品(水果和蔬菜)水提取 物的羟自由基清除率．与目前广泛采用的简单、易行的抗氧化性评价方法一1，1一二苯基苦酰基苯肼 (DPPH