离子排斥色谱紫外检测法测定奶粉中双氰胺含量.pdfVIP

第41卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 第11期 2013年11月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 1734～1738 离子排斥色谱紫外检测法测定奶粉中双氰胺含量 陈梅兰“ 潘广文2 戴琨2 曾雪灵2 叶明立2 (浙江树人大学生物与环境工程学院，杭州310015)2(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，上海201203) 摘要建立了离子排斥色谱一紫外检测测定奶粉中双氰胺的方法，并用离子色谱一质谱进行验证。样品分别 用水(固液比为l：2)和乙腈(固液比为1：8)振摇后，离心分离过0．22斗m微膜，直接进离子排斥柱(IonPac@ mmx9 ICE—ASl，250mm，5恤m)分离，采用3mmol／L甲酸一乙腈(3：2，V／V)的混合液为流动相，流速为 0．8mL／min，检测波长220am，柱温为30℃。结果表明，双氰胺的浓度在50斗∥L～0．3g／L范围内的相关系 数r=0．9999，检出限(S／N≥3)为12．5ng／mL。添加浓度水平为500ng／g，0．5mg／g和3．6mg／g时，方法的回 收率在97．6％～100％之间，相对标准偏差为0．8％。 关键词双氰胺；离子排斥色谱；紫外检测；奶粉 1 引 言 氮元素是植物健康生长的重要元素，然而过量的氮肥施用及家畜排泄物经土壤中的硝化细菌作用， 会产生大量N03，造成了氮肥的流失和水质的污染。双氰胺，化学式C：H。N。，可通过抑制硝化细菌的活 性，降低N啦转化成NO；，因而常被用作农田硝化细菌的抑制剂¨“J。但在牧场中的过量使用，可能使 双氰胺积聚在牧草中，而牧草中的纤维素却是奶牛日粮中的重要组成部分，最终会使双氰胺进入奶制 品。双氰胺含氮量较高，有可能被添加到奶源中，以充作蛋白质的含量。直至目前我国还没有奶粉及奶 制品双氰胺的检测标准，也没有双氰胺的限量标准，但是双氰胺具有一定的毒性，人体摄入后对身体有 一定的伤害”J。因此，建立一种快速、方便、低成本的奶粉及奶制品中双氰胺的检测方法很有必要。 法哺卅0|。由于双氰胺的极性较大，使用HPLC法测定时需在流动相中加入离子对试剂，加入离子对试 剂的淋洗液不但平衡时间长，对色谱柱损伤大，且出峰时间受离子对试剂浓度影响。另外，HPLC／MS／ MS仪器价格昂贵，导致分析成本较高，不适于大通量样品的检测。离子排斥色谱(IEC)是以磺化的苯 乙烯．二乙烯基苯阳离子交换树脂为固定相，弱酸或和有机溶剂结合为淋洗液的一种离子色谱模式¨1I， 主要用于无机弱酸¨21、有机酸¨纠和醇的分离。近年来离子排斥色谱已成功的应用于环境、食品和生化 等领域¨4—6|。双氰胺的结构中有多个氮原子，氮原子上的孤对电子使双氰胺分子呈弱酸性，本研究采 ICE．ASl离子排斥柱使双氰胺与三聚氰胺和尿素等分离，利用紫外检测，并成功应用于奶粉样 用Ionpac 品的测试。方法学考察和方法耐用性和色谱柱承受力实验结果良好。 2实验部分 2．1仪器与试剂 TSQVANTAGE(LC—MS)； ICS-2100离子色谱仪；Uhimate3000RS紫外检测器；Ultimate—Thermo mmx9 GENPurePro超纯水仪；IonPac@ICE．ASl离子排斥柱(250mm，5¨m)，1,22：仪器均由美国Ther— (色谱纯，美国Thermofisher试剂公司)；水为MilliQ超纯水。 2013-04-02收稿；2013-08—12接受 本文系浙江省自然科学基金(No．Y5100280)和浙江省分析测试基金(No．2011C37034)资助项目 }E—mail：rain—lake@163．corn 第11期 陈梅兰等：离子排斥色谱紫外检测法测定奶粉中双氰胺含量 2．2实验方法 aLL，得到1．0g／L储备液，用混合流 2．2．1标准溶液的配制称取双氰胺10mg，以水溶解并定容至10