离子液体均匀提取-高效液相色谱法测定参附注射液中4种单酯型乌头碱的含量.pdfVIP

V01．32 高等学校化学学报 No．12 CHEMICAL0F UNIVERSmES 2011年12月 JOURNALCHINESE 2752～2756 离子液体均匀提取-高效液相色谱法测定参附 注射液中4种单酯型乌头碱的含量 杨瑞杰1，李绪文1，张培旭1，姚华1，于爱民1，赵学忠2，金永日1 (1．吉林大学化学学院，长春130012；2．吉林大学白求恩第一医院，长春130021) 摘要采用离子液体均匀提取．高效液相色谱法测定了参附注射液中苯甲酰乌头碱(BA)、苯甲酰新乌头碱 (BM)、苯甲酰次乌头碱(BH)和苯甲酰脱氧乌头碱(BD)的含量．通过优化离子液体的用量、样品溶液的pH 值、提取时间和盐浓度等参数，确定了最佳的提取条件：pH为中性，盐浓度为50g／L，采用0．058g的 [c。Mim][BF4]和0．26g的NH。PF。作为提取剂，样品用量为5mL，提取时间lmin．在优化的实验条件下测 样品进行了分析，加标回收率范围为86．54％～110．67％，RsD值均小于6．12％． 关键词 单酯型乌头碱；参附注射液；离子液体；高效液相色谱 。 中图分类号0657 文献标识码A 文章编号0251JD790(2011)12-2752JD5 参附注射液源于古方“参附汤”，由人参和附子两味中药制成，作为一种常用的急救药物，在临床 用于保护心肌缺血再灌注损伤…，以增强心脏收缩功能，抗心力衰竭口1和心律失常【3]．参附注射液的 主要活性成分为人参皂苷和乌头碱，其中乌头碱类成分主要是单酯型乌头碱，由附子中的双酯型乌头 碱水解生成．单酯型乌头碱与双酯型乌头碱都具有抗炎镇痛活性，但前者毒性大大低于后者．目前， 关于参附注射液中生物碱类物质含量的测定方法有离子对萃取．分光光度法H】、改良的异羟肟酸铁 法¨1、高效液相色谱法旧’刊和液相色谱一串联质谱法坤1等．对于极低浓度生物碱的分析，常用液相色谱一 串联质谱法哺’91来获得较低的检出限，或通过样品前处理来富集待测成分．由于参附注射液中生物碱 的浓度非常低，因此测定前的富集至关重要，传统的有机溶剂液液萃取法需使用大量有机溶剂，对环 境造成污染且富集过程复杂，易导致目标物的损失或化学结构变化，最终导致测定结果不准确． 离子液体又称室温离子液体(Room ionic temperatureliquids，R肌Ls)，是一类室温或相近温度下完 全由离子组成的有机液体化合物．离子液体一般由有机阳离子和无机或有机阴离子组成．与有机溶剂 相比，离子液体具有无毒、蒸汽压极低、不易挥发且结构可调控等优点，已被广泛应用于有机物及金 属离子的萃取分离¨”“1． 离子液体均匀提取技术¨21根据离子液体结构可调控的特点，先将与水互溶的离子液体溶解在水 样中，形成均一溶液后，加入过量的相应盐溶液使之形成疏水性的离子液体，此时被测物经提取进入 离子液体相，离心后进行相分离．与分散液液微萃取【l副相比，此方法无需分散剂，且不需要振荡等外 力作用即可快速达到提取平衡． 本文采用离子液体均匀提取技术结合高效液相色谱法测定了参附注射液中4种单酯型乌头碱苯甲 酰鸟头碱(BA)、苯甲酰新乌头碱(BM)、苯甲酰次乌头碱(BH)和苯甲酰脱氧乌头碱(BD)的含量．结 果表明，此方法简便、快速、准确，为中药注射液的质量控制尤其是微量成分的检测提供了新的富集 方法和研究思路． 收稿H期：2011m5-20． 蔡金项目：国家“十一五”科技支撑计划项目(批准号：2006BAll4舯1)资助． 联系人简介：金永日，男，博士，教授，博士生导师，主要从事天然产物研究．E—mail：jinyr@jlu．edu．cn； 赵学忠，男，博士，教授，主要从事高血压与冠心病的临床诊治与发病机理研究．E．majl：山【zIl@med删Iil．c∞．cn No．12 杨瑞杰等：离子液体均匀提取一高效液相色谱法测定参附注射液中4种单酯型鸟头碱的含量 2753 1 实验部分 1．1试剂与仪器 BA。BM，BH和BD均由本实验室自制，纯度均大