应用禽呼肠孤病毒σ3融合蛋白为抗原的ELISA检测方法的建立.pdfVIP

畜牧与兽医 2007年 第39卷 第11期 ·3· 《 宴 应用禽呼肠孤病毒 融合蛋白为抗原的 ： ELISA检测方法的建立 谢芝勋 ，秦 宇 ，谢丽基 ，刘加波 ， 邓显文 ，庞耀珊 ，谢志勤 ，唐小飞 (1．广西兽医研究所，广西 南宁 530001；2．广西大学动物科技学院，广西南宁 530005) 摘要：将表达的禽呼肠孤病毒 (ARV) 融合蛋白纯化后作为抗原，建立了检测ARV抗体的间接ELISA方法，并对ELISA的反应条件进行了摸 索，确定了抗原的最适包被浓度为3．98 昏／mL，检测血清最适稀释倍数为1：200，血清与抗原反应最佳反应时间为37℃作用2 h，酶标二抗最佳 作用时间为37℃作用1 h，底物的最佳显色时间为25 min。包被的抗原不与新城疫病毒、 亚型禽流感病毒、传染性法氏囊病毒等阳性血清发生 交叉反应。用该方法建立的ELISA诊断方法，具有很好的敏感性和特异性，为ARV的诊断和检测以及血清学调查提供良好的技术手段。 关键词：禽呼肠孤病毒； 融合蛋白；酶联免疫吸附试验 中图分类号：$858。3 文献标识码：A 文章编号：0529-5130(2007)ll·0003-05 Development of an indirect ELISA based on antigen of recombinant o3 protein of avian reovirus XIE Zhi xun ，QIN Yii ，XIE Li-ji ，LIU Jia—bo ， DENG Xian wen ，PANG Yao shan ，XIE Zhi qin ，TANG Xiao—fei (1．Guangxi Veterinary Research Institute，Nanning 530001，China；2。College of Animal Science and Technology，Guangxi University，Nanning 530005，China) Abstract：An indirect ELISA was developed by using the purified fusion fir3 protein as the coating antigen。The optimal concentration of 收稿13期：2006．12-21 年留学回国人员广西科技活动项目择优资助项目。 基金项目：广西留学回国人员基金项目(桂科回0342006)；2005 作者简介：谢芝勋 (1963一)，男，研究员。 表6 猪瘟强弱毒结构多肽SPS和单抗的识别位点 至HCLV的抗原漂移等研究，其目的是在为我国控制和消灭猪 瘟提供技术服务和相应措施。 在访问台湾时，特别重视与猪瘟研究室的交流，其中：猪 瘟免疫失败的调研和抗体水平与攻毒保护是双方所共有的经 历，其余部分都是台湾同行的工作，这些对我们今后的工作有 很好的参考价值。