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【基础研究】
应用PCR．RFLP技术检测乙型肝炎病毒变异rtl233V
郭红英，李新艳，毛日成，尹有宽，张继明·
(复旦大学附属华山医院感染病科，上海200040)
摘要：目的建立一种应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR·RFLP)分析技术检测乙型肝炎病毒(HBV)变
异rtl233V的方法。方法参照GenBank收录的HBV基因逆转录(RT)区序列设计PCR引物，根据HBVRT区rt233位野生
产物分别用BstI107I和Bspl4071两种限制性内切酶进行酶切，观察酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带变化。并以变异型和野生
型质粒的不同配比，分析该检测方法的敏感性。结果本研究建立的PCR：RFLP方法可同时检测野毒株和a1233V变异株。
PCR扩增后，野毒株和rtl233V变异株的PCR产物长度均为255 bp
bp。以Bstll071酶切，野毒株质粒的PCR产物可以切成75
和180
l 80bp两段，野毒株质粒的PCR产物长度保持不变，测序结果与上述结果一致。敏感性检测表明，此方法至少可检出标本
测n1233V变异，’具有较高的敏感性，可用于HBV变异rtl233V的早期诊断。
关键词：乙型肝炎病毒；聚合酶链式反应；限制性片段长度多态性
中图分类号：R512．6+2 文章编号：1672·9188(2009)03—0162·04
文献标志码：A
ofPCR—RFLPinthedetectionof Bvirusrtl233Vmutants
Application hepatitis
GUO You—kuan，ZHANG
Hone—ying，LIXin-yan，MAORi—cheng，YIN Ji—ming
DiseasesandtheCenter 200040,China)
Diseases，Huashan University,Shanghai
(Departmentoflnfectious ofLiver Hospital,Fudan
for Bvirus
Toestablisha convenient．accurateand methoddetectionof
Abstract：Objective practical hepatitis
mutants．MethodstotheHBV in of were
(HBV)rtl233V GenBank．a
According completesequences pairprimers
to thereverse ofHBV BstI107Irestrictionsitewasincludedin
designedamplify transcriptaseregion Single polymerase
chain ofwildand restrictionsiteWaSincludedinPCR ofrtl233Vmutant．
reaction(PCR)produ
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