胸腺素β4在Tenon囊成纤维细胞中的表达及CTGF对其表达的影响.pdfVIP

独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其 他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切 法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 必威体育官网网址□ ，在_____年解密后适用本授权书。 本论文属于 不必威体育官网网址□。 （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 1 引言 青光眼是我国主要致盲原因之一，是最常见的不可逆致盲眼病。目前国内外 治疗青光眼的手术多选择滤过性小梁切除术，术后常见的并发症为滤过泡瘢痕 [1] 化。抑制滤过泡瘢痕化是青光眼滤过术成败的关键之一 。现在临床普遍于滤过 手术中联合使用丝裂霉素、5-氟尿嘧啶等抗代谢药物抑制滤过泡的瘢痕化，使手 术成功率得以提高，但有数据表明滤过术中使用抗代谢药后手术失败率仍高达 15%~25%，抗瘢痕化作用不能持久。且抗代谢药物易引起结膜伤口渗漏、角膜 上皮缺损、低眼压性黄斑病变等较为严重的副作用，另外尚有药物使用个体化差 异难以把握等问题存在[2，3]。 滤过泡瘢痕化的过程与术后过度炎症反应、局部成纤维细胞转化为肌成纤维 细胞、过度分泌胶原蛋白等细胞外基质有着密切的联系。Tβ 是一种重要的G-肌 4 动蛋白偶联蛋白，具有调控炎症反应、促进创口愈合、调节胶原纤维重排和基膜 重建、减少瘢痕形成等多种生物学作用[4]；它可以促进角膜上皮碱烧伤后的角膜 [5] 愈合，并恢复透明 ；它还可以促进心肌梗死模型中心肌和血管内皮细胞的存活、 最大限度的减少瘢痕化的形成[6,7,8]。但对于其在HTFs中的表达及作为纤维化形成 过程中的关键介质的CTGF对它的影响尚没有文献报道。 我们采用免疫组化 SP染色法及RT-PCR扩增法检测体外培养的HTFs 中 Tβ4 的表达，采用半定量 RT-PCR 检测 CTGF 对 Tβ mRNA 表达的影响。为进一步研究 4 Tβ 在青光眼滤过手术后滤过泡瘢痕化形成过程中的具体作用及其机制奠定基 4 础。 4 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 2 实验材料和方法 2.1 组织来源 Tenon 囊组织: 依照赫尔辛基宣言，经患者同意，取自于华中科技大学同济 医学院附属协和医院眼科接受滤过手术的原发性青光眼患者。 2.2 试剂 DMEM-F12 培养基（美国 Hyclone 公司） 胎牛血清（中国杭州四季青生物工程材料研究所）； 1: