肌肉注射人脐带间充质干细胞对阿霉素扩张型心肌病大鼠心肌微血管新生的影响.pdfVIP

摘 要 目的：探讨经肌肉注射途径移植人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs ）对阿霉素扩张 型心肌病大鼠的治疗效应及对心肌微血管再生的影响。 方法：100 只 SPF 级健康 SD 大鼠随机分为 2 组：正常对照组（15 只）和扩张型心 肌病组（简称 DCM 组，85 只）。DCM 组大鼠采用 2mg/kg 阿霉素每周 1 次，连续 8 周建立扩张型心肌病模型。模型建立成功 2 周后，成活的 60 只大鼠随机分为 DCM 模型对照组（DMEM 组，2ml DMEM ）；hUC-MSCs 低剂量组（低剂量组， 1×106 hUC-MSCs ）；hUC-MSCs 高剂量组（高剂量组 10×106 hUC-MSCs ）。干细 胞治疗 4 周后，心脏超声评估大鼠心功能；酶联免疫竞争法（EIA ）检测血浆 BNP 水平；免疫组化标记 CD34 检测心肌微血管密度以及电镜观察微血管结构；实时定 量 PCR 检测心肌 Slit-2、Robo-1 与 Robo-4 表达水平，Western blot 检测心肌 HGF 、 LIF 及 VEGF 蛋白含量。 结果: 在 hUC-MSCs 移植 4 周后，心脏超声提示低剂量组与高剂量组大鼠左室射血 分数（LVEF ）与治疗前对比明显上升[(66.10±1.93)% 至(72.27±2.44)% ， P ＜0.01 ； （66.31±2.97 ）% 至（70.92±2.68 ）%，P ＜0.01] ；左室短缩率（LVFS ）前后对比也 出 现 上 升 [(31.00±1.71)% 至 (34.96±2.08)% ， P ＜ 0.05 ； (31.57±2.45)% 至 (33.49±2.19)% ，P ＜0.05)] ； DMEM 组大鼠 LVEF 、LVFS 均呈下降趋势，但差异无 统计学意义（P ＞0.05 ）。大鼠血浆 BNP 水平明显下降，低剂量组由(352.68±41.25) pg/ml 至 (202.68±20.38) pg/ml ，P ＜0.01 ；高剂量组 由(355.79±48.32) pg/ml 至 (193.62±15.41) pg/ml ，P ＜0.01 ；DMEM 组则继续上升，由(365.42±61.81 ）pg/ml 至 （431.26±52.80 ）pg/ml ，P ＜0.05 。低剂量组与高剂量组大鼠心肌微血管密度与 DMEM 组 对 比 也 明 显 增 多 [(84.00±19.18)/mm2 与 (86.67±20.88)/mm2 比 (27.14±13.97 )/mm2 ，P ＜ 0.01] ，DMEM 组与正常组大鼠对比无明显差异 2 2 [(27.14±13.9)/ mm vs (16.43±5.71) / mm ， P ＞0.05)] ；给予不同剂量hUC-MSCs 移 植的大鼠电镜下心肌微血管的损害程度均要轻于给予 DMEM 注射的大鼠。与 DMEM 组大鼠对比给予 hUC-MSC 移植的大鼠心肌 Slit-2 与 Robo-1 的表达水平明 显升高；而 Robo-4 在各组大鼠间表达水平均差异均无统计学意义。HGF 、VEGF 与 LIF 在低剂量组与高剂量组大鼠心肌含量均高于 DMEM 组（P ＜0.01 ）。 万方数据 结论：肌肉注射 hUC-MSCs 能够明显改善阿霉素诱导的 DCM 大鼠心脏功能；并且 可以上调 Slit-2 、Robo-1、HGF 、LIF 与 VEFG 在大鼠心肌中的表达促进大鼠心肌 微血管再生。hUC-MSCs 可能通过旁分泌大量细胞因子从而发挥对心脏疾病的治疗 效应。 硕士研究生：胡小龙（儿科学） 指导教师：李自普 教授 关键词：人脐带间充质干细胞; 扩张型心肌病; 微血