骨髓间充质干细胞促进骨.docVIP

　　骨髓间充质干细胞促进骨 【摘要】 观察骨髓间充质干细胞对骨-肌腱结合部愈合的 影响 。［ 方法 ］采用骨髓穿刺、全骨髓培养法获取兔骨髓间充质干细胞。36只18周龄新西兰大白兔随机分为2组，实验组将骨髓间充质干细胞与Pluronic F-127载体材料结合后，植入兔髌骨部分切除模型，对照组只进行手术，不植入细胞。在术后6、12、18周进行X线片、大体和组织学观察评估。［结果］X线片显示术后6、12、18周实验组骨-肌腱结合部新生骨面积显著大于对照组(Plt;0.01)。大体观察可见实验组骨-腱结合部愈合较早。HE染色显示实验组术后6周有大量的纤维母细胞和类软骨细胞增生，并可见新骨形成；12周，髌腱与松质骨接触面软骨细胞移行带形成；18周，纤维软骨移行带排列更有序。Safranin 0染色显示实验组术后6周，基质染色较深，部分骨-腱结合处可见相对浓染区；12周，基质染色范围明显减少，沿类软骨细胞走行分布；18周，类软骨细胞集中的区域染色较12周有所减退。组织学检查显示实验组术后6、12、18周骨-腱结合部组织愈合明显，较对照组迅速。［结论］骨髓间充质干细胞可以促进骨-肌腱结合部细胞增生，促进其早期愈合。 【关键词】 骨髓间充质干细胞 骨-肌腱结合部 愈合 　 Abstract：［Objective］To evaluate tho effects of Bone Mesenchymal Stem Cells(BMSCs) on healing of bonetendon junction in a patellar tendon plex.［Method］ The BMSCs of rabbits arroarroy ental group easurements shoore need bone at the patellar tendonpatellar healing junction in the experimental group pared ental group en shoental group considerable fibroblast and chondrocytelike cellular proliferation, need at ed at trabecular bonepatellar tendon junction at en shoental group matrix ed bone to patellar tendon junction,partially thick at atrix stains reduced and distributed along chondrocytelike cells at of chondrocytelike cells concentration ore improved tissue integration in the experimental group at esenchymal stem cells; bonetendon junction; healing 多种原因导致的肌腱止点的损伤，如肩袖损伤、网球肘、部分撕脱型跟腱断裂等发病率逐年增高。骨-肌腱结合部愈合过程比较复杂，该部位的特征性结构纤维软骨带的再生十分缓慢和困难［1］。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells，BMSCs)是多种间充质细胞的前体细胞，有多向分化潜能，传代繁殖能力强，生物相容性好等优点。本 研究 将骨髓间充质干细胞移植入兔髌骨部分切除模型中［2］，通过X线片、大体和组织学研究，观察其在骨-肌腱结合部修复中的作用。 1 材料与方法 1.1 兔BMSCs体外分离，培养与扩增 8周龄新西兰大白兔，无菌条件下抽取股骨干骺端骨髓3 ml，100目钢网过滤，1 200 r/min离心10 min，采用全骨髓培养法以（6～8）×104／cm2置于75 ml培养瓶培养，每瓶含10 ml培养液(含青、链霉素各100 U／ml，体积分数为20%胎牛血清，αMEM)，37℃、5%CO2孵箱中原代培养。4 d后半量换液，以后每48～72 h全量换液。当细胞融合达80％时，0.25％胰蛋白酶消化，以5×104／cm2接种到培养瓶传代，收集第3代细胞供移植用。 1.2 BMSCs移植修复骨-肌腱结合部(bonetendon junction，BTJ)损伤 1.2.1 实验动物及分组 36只18周龄新西兰大白兔，体重2.2～2.5 kg，随机分为实验组(BMSCs+载体Pluronic F-127)和对照组(只手术，不植入BMSCs和载体)，分6、12、18周3个时间点，每个时间点6只。 1.2.2 兔髌骨部分切除手术［2］