分析柴胡黄芪不同比例配伍对急性癫痫小鼠的影响.docVIP

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分析柴胡黄芪不同比例配伍对急性癫痫小鼠的影响

分析柴胡黄芪不同比例配伍对急性癫痫小鼠的影响   癫痫( EP) 作为一类因多种综合因素作用,致使脑部神经元细胞电信号( 异常放电) 传递高度同步化,导致中枢神经系统出现短暂性功能失常,而引发的一种临床综合征,其临床发病率呈现增长趋势。有研究发现,癫痫与多种脑功能障碍或代谢疾病有着紧密的联系,因而西药治疗效果较差,且副反应大,而祖国医学治疗癫痫多以“从肝论治”为主,其中以《伤寒论》中柴胡疏肝汤配伍治疗最为有代表性; 基于此,本文通过搭建4 种急性癫痫小鼠模型: MES 组、PTZ 组、PLCP 组及STR 组,对该汤剂中柴胡黄芪不同配伍比例的抗癫痫治疗效果进行分析,现报道如下。   1 材料与方法   1. 1 材料及分组   选取240 只无特定病原体( SPF)级昆明小鼠( 雄性) 为实验对象,体重( 20plusmn;2) g,由河北联合大学医学院动物实验中心提供,其中60只符合MES 模型条件,记为MES 组; 另外180 只小鼠分成三组,分别制备为PTZ ( 戊四氮) 、PLCP( 匹罗卡品) 及STR ( 士的宁) 急性癫痫小鼠模型。   1. 2 实验设备及试剂   实验设备: WA. -165-YSD-4G 型药理生理实验多用仪,购自北京卓川电子科技有限公司; 试剂: PTZ、PLCP、STR 试剂均由Sigma公司生产,地西泮注射液购自芜湖康奇制药有限公司生产,国字 柴胡、黄芪中药材均购自北京同仁堂河北中药材料科技开发公司,并由我院药剂科主任鉴定合格。   1. 3 药剂配制方法   地西泮、PTZ、PLCP、STR 使用前,均与不同量的生理盐水混合,依次配制成浓度为0. 4mg /ml、8. 5mg /ml、40mg /ml 与0. 2mg /ml的溶液,而E 组柴胡黄芪依据自拟柴胡疏肝汤剂中的剂量,以5: 2 比例配制,依照如下操作煎制: 8倍水量混合rarr;浸泡30 分钟rarr;煎煮120 分钟rarr;煎煮90分钟rarr;合并煎煮药浓缩rarr;0. 3g /ml 溶液; B 组( 单纯黄芪组) 、C 组( 单纯柴胡组) 、D 组( 柴胡: 黄芪= 1: 1) 药液煎制,均依据药物总量相同原则,依据E 组方法熬制,药液浓度依次为0. 42g /ml、0. 42g /ml、0. 21g /ml ( 柴胡浓度) 。   1. 4 MES 癫痫小鼠造模与处理依据   多用仪设备筛选符合条件的小鼠,用齿状夹( 生理盐水清洗、消毒处理) 将小鼠两耳尖部夹住,行电击刺激,电流刺激参数设定: 交流电,100V,2Hz,单次刺激; 惊厥指标: 小鼠后肢出现强直性伸直; 将符合上述筛选条件的小鼠随机分成A-F 组6 小组,空腹8 小时后行灌胃给药,并依据2ml /100g 计算灌胃体积,AF组分别给予地西泮0. 4mg /ml、柴胡0. 42g /ml、黄芪0. 42g /ml、柴胡( 黄芪) 0. 21g /ml、柴胡0. 3g /ml( 黄芪0. 12g /ml) 及等体积生理盐水灌胃,末次给药60 分钟后,行上述电流刺激,观察惊厥率,记录强直持续时间。   1. 5 PTZ、PLCP 及STR 急性癫痫小鼠造模与处理   PTZ 组: 抽取60 只SPF 级昆明小鼠,小组分配及给药方法与MES 组相同,于末次给药60 分钟后,同时6 小组小鼠接受腹腔注射PTZ 85mg /kg 溶液; PLCP组: 分组及初始给药均同MES 组,末次给药60 分钟后,各组小鼠腹腔注射PLCP 400mg /kg; STR 组: 分组及初始给药均同MES 组,于末次给药60 分钟后,腹腔注射STR 2mg /kg; 三大组行上述处理后,均观察注射30 分钟内痫性发作情况,记录各组小鼠痫性发作的潜伏期时间。   1. 6 痫性发作级别评定及潜伏期判断标准   依据Racine 经典痫性评定标准判定,0 级: 小鼠无任何反应; 1 级: 发作反应,小鼠口角节律性抽动,或面部肌肉、耳阵挛; 2 级: 小鼠规律性点头,且面部肌肉明显抽动且阵挛; 3 级: 小鼠前肢阵挛,但无直立抽动; 4 级: 前肢直立且阵挛; 5 级: 小鼠全身僵硬性直立,阵挛发作且跌倒。潜伏期主要分为三段,注射PTZ 开始到痫性发作1 ~ 3 级时间、4 ~ 5 级直至死亡,分别为阵发性痉挛潜伏期、强直性惊厥潜伏期和死亡潜伏期。惊厥率= 惊厥小鼠数目/总数*100%。   1. 7 统计学方法   应用统计学SPSS 19. 0 处理数据,各组间潜伏期等计量资料( x- plusmn;s) 行one-way AN0V

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