食品毒理学致癌毒性2014__培训课件.pptVIP

致癌物的最终确定 　　人类致癌物的确定主要根据：流行病学调查结果能够重复；有剂量反应关系；有动物致癌试验阳性结果支持。 　　对动物致癌物的确定有的认为只要有一种动物试验结果为阳性，甚至是哺乳动物短期致癌试验阳性，即可认为致癌；有的则要求在多种或多品系动物试验中，或在几个不同试验中，特别是不同剂量或不同染毒途径见恶性肿瘤发生率增高；或在肿瘤发生率、出现肿瘤部位、肿瘤类型或出现肿瘤的年龄提前等各方面极为明显突出，才能确定为动物致癌物。 三、动物长期致癌试验 短期筛检试验阳性的受试物，若有重要使用价值，应进行哺乳动物长期致癌试验。 大多数已知的人类致癌物都能诱发动物肿瘤， 因此，通过动物长期致癌试验可以对化学物的致癌性作出充分估计。 三、动物长期致癌试验 肿瘤的发病过程缓慢，距初次接触化学致癌物至最终形成恶性肿瘤，有5~30年的潜伏期。 用啮齿类动物进行1~2年的诱癌试验，相当于人类大半生时间，故又称哺乳动物终生致癌试验，是鉴定动物致癌物的经典方法，结果比较可靠。 三、动物长期致癌试验 1．试验动物的选择 （１）种属： 选用两种啮齿类动物，可选大鼠、小鼠、金黄地鼠等。 啮齿类动物的优点： 对致癌物敏感性高，寿命相对较短、对其生理和病理特征了解较多，“自发肿瘤率”资料较全，饲养费用较低等。 1．试验动物的选择 （２）品系：　 同一种属不同品系的动物对化学致癌物的反应也相当不同。 要选择敏感、自发肿瘤率低，生活力强的品系。 （２）品系： 纯系动物的优点：自然寿命和自发肿瘤率较恒定，免疫性状相同，试验容易重复，便于结果比较。 杂交系动物的优点： 抗感染力较强，遗传特性比纯系动物复杂而更具有代表性。 杂交一代动物，可兼具二者的优点。 ２、动物年龄 选用刚断奶的幼年动物，不迟于出生后7~9周。 幼年动物肝药酶和免疫系统的发育还不完善，对受试物较敏感。 使致癌性较弱，潜伏期较长的致癌物有充分发挥作用的时间。 ３、动物数量 每组至少雌雄各50只动物。 动物数量应足够体现阳性反应，以免样本太小而不能全面反映总体情况。 每组动物数在试验结束时，应能满足统计分析的需要。 ４、动物性别 同等数量的雌、雄两性动物，以接近人类实际情况。 ５、给药途径 口服：喂饲法或灌胃。 喂饲法：将化合物混合在饲料或饮水中。挥发性或化学性质不稳定的化合物不宜采用。 灌胃：准确控制剂量。 ６、剂量选择和分组 　　 为了观察剂量—反应关系，至少设高、中、低3个剂量组。 高剂量大，可以缩短出现肿瘤的潜伏期，消除动物易感性的个体差异。 剂量亦不能过大，以免出现慢性毒性，使动物寿命缩短，以致大部分动物在肿瘤潜伏期之前死亡。 ６、剂量选择和分组 设立高剂量的原则： 最大耐受量(与对照组相比，动物体重增长抑制不超过10％，无中毒死亡动物，一般状况变化不大。) 一般先进行短期预试验，同时参考长期毒性试验结果确定高剂量。 ６、剂量选择和分组 低剂量：临床拟用剂量的１~３倍。 中间剂量：与高低剂量成等比级数关系。 另设空白对照组和溶媒或赋形剂对照组。 ６、剂量选择和分组 阳性对照组： 必要时可设。选用与受试物结构相近的已知致癌物作阳性对照物。 意义： 检测动物的敏感性，以及试验设计、设备和操作过程的合理性，以便评价试验结果的可靠性和比较受试物致癌性的相对强度。 ７、试验期限 动物正常寿命的大部分时间或终生 大鼠：两年以上（平均寿命2~2.5年） 小鼠：一年半以上（平均寿命1.5~2年）。 当给药组与阴性对照组之间肿瘤发生率已有明显差别时，可提早结束试验。 有观点认为：为减少中途非肿瘤死亡，应在9-12月后停止给药 支持：使得动物由中毒或亚中毒状态恢复，存活时间较长和存活动物较多； 反对：虽对完全致癌物无较大影响，对于促癌剂可能出现可逆反应，导致肿瘤发生率下降 8、动物饲养 恒温、恒湿大、小鼠：23.3±1.1℃、40±5% 饲料中不能含有亚硝胺、黄曲霉素和杀虫剂等可能的致癌物质 自然存在于动物饲料中的各种酶的诱导剂和抑制剂可能影响动物肿瘤的发生或其他一些参数的变化 9、观察与检查 （1）一般观察： 每天观察动物1~2次，外表、活动、摄食状况等。定期称量体重。 全身浅表部位有无肿块，以及肿块出现的时间、部位、大小、数目、质地、发展速度及动物死亡时间等。 （1）一般观察： 疑为白血病时，作血液检查。 试验中途死亡或濒死的动物，应及时解剖检查，防止组织自溶。对全身各组织器官逐一取样，特别是有肿块或有病变的部位，留待病理组织学检查。 （2）解剖和病理组织学检察 试验结束时，处死动物。大体解剖，肉眼观察各组织器官