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中药二妙丸质量标准的研究 　　【摘要】为更好的控制传统中药二妙丸的质量，提高二妙丸的质量标准，建立了二妙丸中苍术药材的薄层色谱鉴别，并使用高效液相色谱法测定了制剂中的盐酸小檗碱含量。采用硅胶G薄层板，以石油醚（60-90℃）-醋酯乙酯（20：1）为展开剂，建立了苍术药材的特征性色谱鉴别。采用反相高效液相色谱法，intersilODS-3C18柱（5μm，250×4.6mm），流动相为乙腈-磷酸二氢钠二氢钠-SDS（45：55：0.01）；流速为1.0ml/min；检测波长为345nm；柱温30℃。供试品使用1%盐酸甲醇提取。经方法学验证，本方法具有良好的线性、精密度、稳定性、回收率。结果显示，该方法分离效果较好，分析快速方便，为二妙丸的质量控制提供了依据。 　　【关键词】二妙丸；盐酸小檗碱；苍术；黄柏；高效液相色谱；薄层色谱 　　doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.08.045文章编号：1004-7484（2013）-08-4204-03 　　二妙丸系元代《丹溪心法》中方[1]，由苍术、黄柏两味药组成，原为散剂，《世医得效方》中又名苍术散，后由散剂改为水丸剂。具有清热燥湿的功效，用于湿热下注，足膝红肿热痛，下肢丹毒，白带，阴囊湿痒。中国药典2000年版[2]收载了黄柏的薄层鉴别方法和黄柏的主要指标成分盐酸小檗碱的薄层扫描色谱法测定盐酸小檗碱操作较为烦琐，对试验条件要求高，试验误差较大。为建立科学、全面评价制剂质量的客观指标，本文建立了制剂中苍术药材的薄层色谱法鉴别，并使用高效液相色谱法测定了制剂中的盐酸小檗碱含量。 　　中国药典2000版中规定，苍术药材为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea（Thunb.）DC.或北苍术Atractylodes chinensis（DC.）Koidz.的干燥根茎。性辛、苦、温。归脾、胃、肝经。黄柏药材为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinese Schneid.或黄檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥树皮。性苦、寒，归肾、膀胱经。前者习称“川黄柏”，后者习称“关黄柏”。在二妙丸的制剂中，现多习用茅苍术和川黄柏，因此本文中实验均使用这两种药材。苍术中主要万分为挥发油类[3]，黄柏中主要成分为生物碱类，其中又以小檗碱（berberine）（化学结构式见图1）为代表[4]，因此本文对苍术中的挥发油建立了薄层色谱鉴别，对黄柏中的盐酸小檗碱建立了高效液相色谱含量测定。 　　1仪器和材料 　　1.1仪器日本岛津LC-10AVP高效液相色谱仪（包括在线脱气机、二元泵、SPD-M10AVP二级管阵列检测器，CLASS-VP5。03软件）；Metler十万分之一电子分析天平。 　　1.2试药盐酸小檗碱购自中国药品生物制品检定所；苍术对照药材购自中国药品生物制口品检定所；茅苍术购自邯郸药材公司，经鉴定为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea（Thunb.）DC.的干燥根茎；川黄柏购自邯郸药材公司，经鉴定为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.的干燥树皮；乙腈为色谱纯；磷酸二氢钠、十二烷基磺酸钠（SDS）等其他试剂为分析纯。 　　2实验方法和结果 　　2.1苍术的薄层色谱鉴别取二妙丸1g，研为细粉，加正已烷4ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。 　　另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述新制备的两种溶液各5μl，分别于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60-90）℃-醋酸乙酯（20：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；并应显有一相同的污绿色主斑点（苍术素）。结果见图2。 　　2.2高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量 　　2.2.1色谱条件色谱柱为IntersilODS-3 C18柱（5μm，250×4.6mm）（GLScience.Co.Ltd）；流动相为乙腈-磷酸二氢钠-SDS（45：55：0.01）；流速为1.0mL/min；检测波长为345nm；柱温30℃。在上述色谱条件下，小檗碱与其他成分得到了较好的分离，小檗碱的保留时间为28 min，理论塔板数为4000，进样量20μl，图3。 　　2.2.2供试品溶液的制备取二妙丸5g，研细，精密称取2.0g置具塞锥形瓶中，精密移取1%的盐酸甲醇溶液50ml，称重，超声提取30min，放冷，补足1%的盐酸甲醇溶液至恒重，摇匀，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣用于乙醚脱脂后，甲醇定容于25ml容量瓶中，即为供试品溶液