万寿菊叶黄素抗氧化作用量效关系研究.docVIP

万寿菊叶黄素抗氧化作用量效关系研究 　　摘要：目的 观察万寿菊叶黄素抗氧化作用的量效关系，为临床使用剂量提供实验数据。方法 小鼠随机分为空白组、模型组及叶黄素1、5、25、125、625 mg/kg组。模型组及各给药组小鼠腹腔注射D-半乳糖120 mg/kg制备氧化损伤模型，空白组注射等体积生理盐水溶液，造模期间各组动物给予相应药物，连续造模7周。测定血清中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性，观察受试物的量效关系。结果 叶黄素1、5、25 mg/kg剂量组可显著降低模型小鼠血清MDA水平和升高SOD活性，125、625 mg/kg剂量组则未显示出显著的抗氧化活性。结论 叶黄素对小鼠D-半乳糖氧化损伤模型抗氧化活性在1～25 mg/kg范围内较为显著，提示临床用量应在此范围内进行选择，不宜超大剂量服用。 　　关键词：万寿菊；叶黄素；小鼠；D-半乳糖；抗氧化；量效关系 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.09.009 　　中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）09-0026-02 　　万寿菊花为菊科植物万寿菊（Tagetes erecta L.）的花，具有清热解毒、化痰止咳等功效。其化学成分主要为类胡萝卜素、黄酮类、萜类成分[1]。万寿菊花的类胡萝卜素化合物主要为叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素和大量的叶黄素酯等。其中，叶黄素及叶黄素酯占大多数，具有多种生物学功能，尤以抗氧化、缓解视疲劳、防止心血管疾病、提高免疫力和抗癌作用突出[2-3]。 　　目前，万寿菊提取物叶黄素已作为抗氧化功能食品添加剂广泛用于缓解视疲劳和抗氧化等产品中，具有较为广阔的市场前景。但目前叶黄素人体应用存在有效剂量不明确等突出问题，这给以叶黄素为原料的保健食品研发和审评带来了困扰和盲目性。本研究以D-半乳糖所致小鼠氧化损伤模型为切入点，观察万寿菊叶黄素提取物对氧化损伤的影响，进而探讨其抗氧化功能的量效关系，为临床人体使用提供实验数据参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物 　　ICR小鼠，SPF级，雄性，体质量18～22 g，购自北京大学医学部实验动物科学部，许可证号：SCXK（京）2006-0008。 　　1.2 药物 　　叶黄素（万寿菊提取），批号005-1202104-17，含量82.30%，天津市尖峰天然产物研究开发有限公司。 　　1.3 试剂 　　D-半乳糖，Sigma-Aldrich，货号0637。0.5%羧甲基纤维素钠溶液，批天津市光复精细化工研究所。丙二醛（MDA）测定试剂盒，批超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒，批南京建成生物工程研究所。 　　1.4 仪器 　　Sartorious BT 124S电子精密天平，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；半自动生化测定仪，Microlab 300，Vital Scientific Inc.；IKA MS 3 数字振荡器，德国；Sigma 3K15、1-15PK离心机，德国。 　　1.5 分组、造模与给药 　　小鼠按体质量随机分为空白组、模型组及叶黄素1、5、25、125、625 mg/kg组，每组12只。模型组及各给药组小鼠每日腹腔注射D-半乳糖120 mg/kg（0.1 mL/10 g体质量）制备氧化损伤模型[4-5]，空白组注射等体积生理盐水，连续造模7周。造模开始给药组给予不同剂量叶黄素，空白组和模型组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液，灌胃体积为20 mL/kg。 　　1.6 指标测定 　　末次给药前实验动物禁食不禁水16 h，末次给药后1 h，各组小鼠眼眶后静脉丛取血，离心取血清。按试剂盒说明书测定血清中MDA含量和SOD活性。 　　1.7 统计学方法 　　采用SPSS10.0统计软件进行分析。数据用―x±s表示，采用方差分析。P0.05表示差异有统计学意义。 　　2 结果（见表1） 　　3 讨论 　　叶黄素是一种属于类胡萝卜素的黄色化学色素，在自然界中叶黄素主要存在于绿叶菜、桔黄色蔬菜、桔黄色水果、谷物及鸡蛋制品中[6-7]。叶黄素是天然抗氧化剂，具有良好的抵御游离基在人体内造成的细胞与器官损伤的能力[8]，可用于防治由于机体衰老引发的冠心病、心血管硬化和肿瘤等疾病[9]。万寿菊的干花瓣中含有高浓度的类胡萝卜素，其中反式叶黄素酯的含量很高，而其他类胡萝卜素的含量较少，是非常好的叶黄素来源[10]。目前，以万寿菊中提取的叶黄素制品已被欧美和我国批准用于食品添加剂和功能保健食品，以发挥其抗氧化、保护视力、缓解视疲劳等功效[11-12]。 　　虽然目前万寿菊叶黄素已被广泛应用，但从市