三种蕨类植物的体保存技术研究.pdfVIP

摘要 本文以三种蕨类植物(荷叶铁线蕨、鹿角蕨和铁线蕨)的孢予、原叶体、孢子 体为材料，在三种不同温度下(4。C、-72℃、一196℃)进行保存，保存的时间分别 为1天、l星期、和一个月，比较不同温度保存对蕨类植物生理和生活特性的影响， 以找出一种最佳的蕨类植物低温保存的技术体系。研究内容包括：孢子低温保存后 的生活率和萌发、原叶体低温保存后的生活力和分化、孢予体低温保存后的存活率 以及铁线蕨和鹿角蕨的低温保存后的快繁体系。结果表明： 1三种蕨类孢子的低温保存在4。C和．729C的温度处理下，随着时间的延长，孢 子存活率随之下降；在．196℃条件下，存活率基本保持不变。两种解冻方法对孢子 存活率的影响没有显著性差异。 2铁线蕨和鹿角蕨原叶体在4℃和一7二℃条件下，其存活率随着冷冻时间的延长 而迅速下降；在液氮冷冻后，存活率保持较高水平，而且不随保存时间的延长而下 降。快速解冻有利于原叶体的成活。接种到培养基上后放入4C冰箱中保存，保存 60天后还保存较高的生活力。 3鹿角蕨孢子体液氮保存的成活率可以达到80％以上，两种解冻方法对孢子体 存活率的影响有着显著差异。 4适合鹿角蕨和铁线蕨低温保存的技术体系为：孢子长期保存在液氮里最佳， 短期以4℃最好，时间不超过一个月，解冻两种方法都可以。原叶体与孢子体保存 60％玻璃化溶液(40％O．1 于0C下处理50_-60分钟，再换新鲜保护和，迅速投入冷冻仪器中。将原叶体接种 到培养基上再放入4。C冰箱中保存，也可保存较长时间。 蔗糖，pH6．0；在原叶体的低温保存后，最适合原叶体增殖的培养基为： MS+BA(1．0)+NAA(0．1)+3．0％蔗糖+0 7％琼脂，pH6．0：冷冻后诱导孢子体的最佳培 养基为：1／2MS培养基+3．0％蔗糖+O．7％琼脂，pH6．0： 蔗糖，pH6．O：在原叶体的低温保存后，最适合原叶体增殖的培养基为：MS+BA(1．∞ +NAA(O．5)+3．O％蔗糖+0．7％琼脂，pH6O：冷冻后诱导孢子体的最佳培养基为：1／2MS 培养基+3．O％蔗糖+O．7％琼脂，pH6．0： 关键词：荷叶铁线蕨 铁线蕨 鹿角蕨 低温保存 组织培养存活率 ABSTRACT abest for as out establisha tofind istO thisresearch way of obiectire technique The of are ferns materials sporophyte efficiently．The spore、prathollium． Dresenring and wallichii． AdianmmrenifovineL．vat．sinese；Adiantum Platycerium capillus—veneris ofdifferent atdifferent onfern‘S theeffect tOdiscover Inorder