一个潜在的可区独瘟兔化弱毒和野毒方法的探索.pdf

摘要 本研究用反转录．聚合酶链式反应(I汀一PCR)技术对广西部分猪场的健 康猪扁桃体材料以及流产胎儿和死胎中的猪瘟病毒(HCV)进行检测，试验 所用引物为成熟的引物Al／A2，它对所有的HCV都可扩增。检测结果，70 5．7％．52份流产胎儿及死胎 份健康猪扁桃体材料中阳性11份，阳性率达1 中检测阳性9份，阳性率达17．3％。由此表明，广西区内猪场中有比较严重 的健康带毒情况以及猪瘟病毒是引起猪繁殖障碍的重要病原之一。 ，在此基础上，我们根据中度保守的E2基因设计了两对引物EPI／EP4、 EP，／EP，(暂定名为非通用引物)，用这两对引物对上述检测过的阳性材料以 及病猪的带毒阳性材料、HCLV、石|、j强毒进行RT．PCR扩增。实验中用这 两对引物对19份阳性病料(其中有10份为发病猪材料)进行扩增，结果全部 没有扩增出特异性核酸带．而HCLV和石门株则可以扩增出特异性核酸带。 接着我们用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)对I9份阳性材料、HCLV 和石门毒的引物A1／A2的PCR产物进行分析，发现HCLV、石门强毒和广西 流行野毒非结构蛋白基因P120的RT—PCR扩增产物中均有RsaI的一个的识 别序列，但HCLV和其他毒株的识别序列所在位置不同。本实验研究表明， 用引物Al／A2、EPl／EP4 EP2／EP3和RFLP分析技术可把兔化弱毒和流行野毒 区分开来，而且应用非通用引物进行区分猪瘟兔化弱毒和流行野毒更为方便、 易行，这将对预防猪瘟起到十分重要的作用。 反转录． 引物(A1俄云EP难弛—弹题l 聚合酶链式反应 限制性片段长废多态性分析法 method the a distinguishing The ofpotential probing the Virus from CholeraLapinized Attenuated Hog HCV of wild virus type Sun Postgraduate Jingfeng Yu Kelun AdvisorProfessor Dr Luo Tingrong 2000 MAY Infectious Of andAnim