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rt-pcr方对禽流感鉴别诊断的应用研究

摘 要 RT—PCR技术,即逆转录多聚酶链式反应,是将真核生物或原 核生物的mRNA经反转录成cDNA后,再进行的PCR扩增的一种技 术。自1985年问世以来,在兽医临床诊断上得到了很大的应用, 如病毒的检测、基因工程疫苗的开发等等。禽流感是禽类的一种 烈性传染病,给世界养禽业造成很大的经济损失,对该病进行快 速准确的诊断和预防显得尤为重要0论文着重对禽流感的PCR快 速诊断方法进行研究。研究中分别选择了禽流感病毒非特异性的 NP(核蛋白)基因和亚型特异性的HA(血凝素)基因建立了PCR 快速扩增方法。在此基础上完善病毒基因的扩增条件,从而初步 建立了禽流感及其不同亚型的PCR快速检测方法。在用该方法对 分离自不同地区的疑似禽流感的组织样品检测中可靠性达90%以 上。另外,对本实验室分离的禽流感毒株进行了NP的全序列扩增 和序列分析。结果表明,所扩增的目的片段长度与预期设计的一 97香港鸡禽流感(H5N1)毒株的核蛋白基因相比有较高的同源 一陛。 关键词: 禽流感, 病毒, 快速检测,PCR,核蛋白基因 第1页 Abstract chain a reaction)is transcriptionpolymerase RT—PCR(reverse tuRNA or can the of methodwhichtranscript procarvoteseucaryotes the PCR.Sinceinventedin intocDNA.then cDNA amplify by in 1 been used clinic 985.ithas the ofanimaldisease. widely diagnosis of in suchasdetection used vaccineetc. virus.and geneengineering Avianinfluenza akindofacuteinfection.ithas virus(Aiv)iS brought to economiclOSStheworld’Sbirds a great breedingindustry,SOrapid andaccurate tothediseaseiS diagnosis very important.ThisPaDer on the ofthe detectionofAIV.Intheresearch. emphasizestudy quick wechoose AIV NP and se

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