发状念珠蓝细菌细胞的优化生长及活性成分的研究.pdf

oPTIMIZINGTHEGRoWTHCoNDITIoNAND STUDYINGTHEACTIVE oF NoSToCFLAGELLlFoRMEC墨l忑s AThesisSubmittedto Shaanxi ofScienceand University Technology inPartialFulfillmentofthe forthe of RequirementDegree Masterof Science Engineering By．Y．．．．．．i．．n．．．．．．．W．．．．．．．．e．．．．n．．．．c．．．．u．．．．i． Thesis Supervisor：Professor．C．．．．．．．．．．h．．．．．．．e．．．．．．．n．．．．．．．．．．X．．．．．．．．．．．u．．．．．．—e———————f————e——————n———————g．—． May,2012 ＼． 发状念珠蓝细菌细胞的优化生长及其活性成分研究 摘要 发状念珠蓝细菌又称发菜，是一种生长在干旱、半干旱的荒漠地区 的陆生蓝细菌。为了恢复发状念珠蓝细菌有限的生物资源和对其活性成 分研究，本文以液态培养的发状念珠蓝细菌为菌源，接种于三种不同的 固体基质上培养，通过添加三种不同的亲水性胞外多糖，调节固体基质 对水分的润湿情况，使发状念珠蓝细菌能够很好的在固体材料上生长； 对液培发状念珠蓝细菌多糖改性工艺、分离纯化和化学结构做了初步研 究；发状念珠蓝细菌藻蓝蛋白的提取工艺和酯化后多糖的抗氧化活性也 做了相关研究，对发状念珠蓝细菌生物体内产多糖酶做了初步的提取和 活性检测研究。主要结果如下： (1)通过添加具有亲水性的果胶、海藻酸钠和阿拉伯胶三种多糖均 能提高发菜细胞生物量，其中添加果胶最有利于发菜细胞的生长，海藻酸 钠次之，阿拉伯胶的作用最小。另外，多糖的添加量并非越多越好，0．3％ 的多糖添加量为最宜，超过0．3％后，发菜细胞生物量反而会减少。 (2)通过酯化度的测定，确定了发菜多糖的最佳酯化方法(氨基磺 酸法)和最合适的溶剂(吡啶)，以及发菜胞外多糖酯化的最优工艺条 化的最优工艺条件：时间2h，温度60℃，物料比l：2．5，料液比l：40。 G．100葡聚糖 (3)酯化后的多糖通过DEAE．52柱层析和Sephadex 凝胶柱分离纯化，通过紫外光谱和红外光谱分析进一步证明发菜多糖酯 化成功；并对酯化后多糖的抗氧化能力进行研究，酯化前后发菜多糖对 DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有清除能力，在一定浓 度范围内，发菜多糖对三种自由基的清除效果与多糖浓度成正相关，酯 化后多糖的抗氧化能力高于未酯化多糖的。 (4)超声波辅助提取法确定发菜藻蓝蛋白的最佳提取工艺条件：液 min。 固比l