蛋白X11α和X11βC端结构和功能研究.pdf

摘要 摘要 X11蛋白家族，也称Mint家族，是一个含多个蛋白．蛋白结构域的脚手架 Q、X11 蛋白家族，包含X11 13和X1l Y三种蛋白。Xl1 Q和X1113在神经元中 特异性表达。 阿尔茨海默病，是一种以进行性痴呆为主的大脑疾病。APP(13．淀粉样蛋 白)的代谢异常和A。的沉积是阿尔茨海默病的主要诱因。X11蛋白家族近年来 颇受关注，主要因为能够调节APP的水解过程和A。的生成，故此被认为是阿尔 茨海默病的潜在治疗途径。除此以外，X1l蛋白家族在突触小泡的锚靠和胞外分 泌过程中也有重要作用，还参与离子通道的定位和运输，以及蛋白的运输和转 运。 X11蛋白家族在结构上高度保守，三个成员在C端部分都有一个PTB域 及2个相连的PDZ域。X11Q的C末端折叠插入自身第一个PDZ域的结合区中， 从而阻碍了其它蛋白的结合。这种独特构象可作为X1l(31与其配体之间的调节机 1 制。X113的PDZ结构域晶体结构尚未见文献报道 本实验表达纯化了三种蛋白：自抑制的X11a(PTB．PDZl2．C)、解除了自 抑制构象的X11Ⅱ(PTB．PDZl2．C)Y836E和X1113(PTB．PDZl2．C)。通过蛋白质 结晶筛选，得到蛋白x11 B(PTB．PDZl2．c)的微晶，为进一步优化结晶条件得到 B 可以用于衍射的晶体，并最终解析X11C端部分的晶体结构提供了基础。另外， Q(PTB．PDZl2．C)结合的蛋白条带，以及同时与三种蛋白结合的蛋白条带，接下 来可以通过质谱分析鉴定配体蛋白，进一步研究这种结合作用的具体结构域与 生物体内的功能。 关键词：X11；蛋白纯化；蛋白结晶；pull·down实验 Abstract Abstact TheX11 calledtheMm multidomain proteinfamily,also family,ale scaffolding three andX1 1 Q andX11 containsmembers：X1 proteins．Thefamily la，X11D 17．X1 Bare inneurones． expressedprimarily Alzheimer’Sdiseaseisakindof dementiaofcentralnervous progressive system． ofA Themismetabolismof accumulationB APP(B-amyloidprecursorprotein)and to centraltothe ofAlzheimersdisease．The ale believedbe generally pathogenesis X11Shavebecomemoreandmoreattractive becauseCan recently,mainlythey modulate ofAPPand of thatmakesthem