大黄鱼嗅觉受体基因及其功能研究.pdf

目录 目录………………………………………………………………………………………．． 致谢………………………………………………………………………………………．． 中文摘要……………………………………………………………。 Abstract…………………………………………………………………………………．． 缩写、符号清单、术语表…………………………………………． 第一章文献综述…………………………………………………… 1嗅觉器官的解剖学结构………………………………………．． 2脊椎动物嗅觉受体信号转导……………………………………． 3嗅觉受体基因……………………………………………………． 4OR基因的进化………………………………………………… 5嗅觉受体与配体………………………………………………．． 6展望与未来……………………………………………………。 7本研究的内容与目的……………………………………………………… 7．1研究目的与意义……………………………………………． 7．2研究内容……………………………………………………… 第二章大黄鱼嗅觉器官及其嗅觉受体研究……………………… 1材料与方法……………………………………………………… 1．1样品采集…………………………………………………… 1．2主要试剂……………………………………………………… 1．3主要仪器…………………………………………………… 1．4研究方法…………………………………………………… 2结果…………………………………………………………………………………． 2．1大黄鱼的嗅觉器官………………………………………… 2．2 Western．blot与免疫荧光标记检测………………………．． 3讨论…………………………………………………………………………………． 4结论……………………………………………………………………………………………………………．2l 第三章大黄鱼嗅觉受体基因的获取…………………………………………………．．22 l材料与方法…………………………………………………………………………22 1．1样品、试剂与仪器……………………………………………………………．．22 1．2方法………………………………………………………………………………………………………23 2结果……………………………………………………………………………………………………………．28 2．1总RNA的提取……………………………………………………………………………………．．28 2．2RT．PCR…………………………………………………………………．．：……………………………29 2．3全长OReDNA的获得…………………………………………………………30 2．4Southernblot验证OR序列在大黄鱼基因组中的拷贝………………………31 3讨论……………………………………………………………………………………………………………．32 4结论……………………………………………………………………………………………………………．33 第四章大黄鱼嗅觉受体基因的进化……………………………………………………35 l材料与方法……………………………_……………………………………………36 2．结果…………………………………………………………………………：…………………………………39 2．1大黄鱼嗅觉受体的数目………………………………………………………．39 2．2系统发生树分析………………………………………………………………．41 2．3鱼类OR基因功能性分化………………………………………………………46 2．4大黄鱼OR基因在嗅觉上皮细胞中的表达水平………………………………49 3讨论……………………………………………………………………………………………………………。51 3．1在不同的鱼类嗅觉基因数量有很大差异……………_………………………51 3．2OR基因的进化过程……………………………………………………………51 3．3OR基因家族的功能性分化……………………………………………………52 3．4OR基因表达与功能……………………………………