RP-HPLC法测定灵芝中5种核苷类成分的含量.pdfVIP

RP．聊也C法测定灵芝中5种核苷类成分的含量 刘永刺，王鑫，刘有平，邸放(沈阳药科大学药物代谢与药物动力学实验室．沈阳t10016) 灵芝是担子菌鳃多孔菌科灵芝属的真菌，常用 2。3方法学考察 其子实体。灵芝性温，昧苦，涉，无毒，具有滋补强 2．3．1系统适用性将供试品溶液按“2．1”项下 壮、扶正固本之功效，临床上主要用于治疗慢性支气 色谱条件进样分析，理论塔板数(N／m)按胞苷计算 管炎、消化不良、神经衰弱、冠心病、肝炎、高血脂、高 不低于64000，按尿苷计算不低于97960，按肌苷计 血压和白细胞减少等疾病。现代研究已证明．三萜、 算不低于218040，按鸟苷计算不低于230800，按腺 多糖和核苷为灵芝中的重要活性成分”3。本文建 苷计算不低于359567，相邻峰的分离度大于1．5， 立了同时测定灵芝中5种核苷类成分含量的RP· 拖尾因子均在O．95—1_03之问。 HPLC分析方法。 2．3．2线性关系精密吸取对照品储备液O．4， mL量瓶中，加 1仪器与试药 1．5．3，O，4．5，6．OIⅡL，分别置于10 50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。配制成系列浓度 Agilen¨100高效液相色谱仪，配有在线脱气 机、低压四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、VwD检 的对照品溶液，分别进样，以各对照品色谱峰面积为 纵坐标(y)．各对照品浓度为横坐标(x)。进行线性 测器、chemst蟠om化学工作站(美国A西1ent公司)； 回归，回归方程见袭1。 胞苷(nul【a公司)，尿苷、腺苷和肌苷对照品(s匆∞ 公司)；鸟苷对照晶(中国科学院生物化学研究所)； 表l 回归方程 甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯； 堡坌 堕塑立堡 ! 丛丝堕堕!坐：!：! 胞苷 y=孤419x一68133 n9辨5 1728一”92 树舌灵芝(岛∞幽m口印PkmlⅡm)、紫芝(血M出m4尿苷 y=4t68x一霉＆矗91O9帕 18．记一28 999 肌苷 y=卯014x一53．35B0 2 11．抖一I秘．6 j妇，m)、黑芝(＆M如m8ofmm)、赤芝(如Md∞m 鸟昔 r。64．s77j一“696 n9993 24．∞-3600 k池m)及松衫灵芝(如w如mn捃昭∞)子实体等 壁茔 !：!!：翌坚=墨：：翌竺!竺! !：堡：!!!：1 药材均由河北省科学院生物研究所提供并鉴定。 2．3．3仪器精密度取对照品溶液重复进样6次， 2方法与结果 求得胞替、尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷峰面积的RsD分 2．1色谱条件 别为0．3％．0．2％，o．9％，O．6％，0．8％。 mm×200 色谱柱：Di锄onsiI(钻石)C】8柱(4．62．3．4稳定性取同一份供试品溶液，室温下放 mm，5岬)；流动相：丸甲醇，B．5mmoI·L“醋酸置，分别于O，2，4。8，12，24h进样分析，测得胞苷、 铵，洗脱程序：0—10min。l％A一5％A；10—35min， 尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷含量的RSD分别为0．5％．