消斑愈肾剂对大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质影响地研究.pdfVIP

维普资讯 · 450 · JournalofPracticalTraditionalChineselnternalMedicine 2003，Vo1．17，No．6 消斑愈肾剂对大 鼠肾小球系膜细胞细胞外基质影响的研究 董 娜 于英华 张 君 (辽宁中医学院附属医院副主任医师，辽宁沈阳 110032) 关 键 词 ：消斑愈 肾剂 ； 肾小球系膜细胞 ； 细胞转化 因子 ； 细胞外基质 中图分类号 ：R331 文献标识码 ：A 文章编号 ：1671—7813(2003)06—0450—02 近年来随着对 肾小球渐进性损伤 根据谌贻璞方法进行大 鼠肾小球系膜细胞培养，并经形态 机制认识 的不断 深入 ，肾小球系膜 细 学及功能方法鉴定培养细胞为肾小球系膜细胞，取亚培养的 胞、细胞外基质及各种细胞 因子在 肾功 第 2—3代细胞用于实验 。 能进行性减退过程 中所起 的重要作用 正常大 鼠血清 、含消斑愈 肾剂、强的松、肾炎舒大 鼠血清 倍受关注。抑制 MC增殖 ，减少 ECM 的制备 按随机分组 的原则将 50只 SD大 鼠分为 5组 ，正常 的堆积 ，拮抗细胞 因子 的不 良作用 ，已 大 鼠组、消斑愈 肾剂治疗组 (含高 、低剂量组 )、强 的松治疗 —～ 成为防治肾小球硬化 ，延缓 肾脏纤维化 组、肾炎舒治疗组 病情进展 的重要环节 。过敏性紫瘕性 含消斑愈肾剂大 鼠血清的制备 ：按 消斑 愈肾剂低剂量 肾炎是儿童期重要的继发性 肾小球疾病，约 占儿童期 肾小球 20g／Kg／天，高剂量 40g／Kg／9~,：，稀释于 3ml蒸馏水 中，每 日 疾病 的 7％，其 中约 12％可发展至终末 肾功衰竭 。本研究采 灌 胃1次，连续 2周 ，于末次灌 胃2小时后腹主动脉取血 ，离 用体外培养 的大 鼠MC技术和血洁药理学方法 ，利用血管 紧 心取血清 ，灭 活补体后 0．22ttm无菌滤器过滤 ，分装冻存 。 张素 Ⅱ(AngⅡ)作为一种刺激 因_了作 用于体外 培养 的肾小 正常大 鼠血清 的制备 ：每 日灌 胃蒸馏水 3ml，2周后取血 球系膜细胞，观察了具有益气活血 、清热解毒功效 的中药复 及处理方法与消斑愈 肾剂组相 同。 方制 剂消斑愈 肾剂对系膜 细胞转 化生长因子 一pl(TGF一 强的松、肾炎舒大 鼠血清 的制备 ：每 日强 的松 5．4rag／ )mRNA的表达及对细胞外基质 的主要成分纤维连接蛋 白 、 肾炎舒 6．3g／kg稀释于 3ml蒸馏水灌 胃，2周后取血及 (FN)、IV型胶原的影响，并 以西药强的松、中药 肾炎舒为对 处理方法与实验组相 同。 照，冀从细胞水平探讨其 延缓 肾小球硬化 的作用机制 ，为进 实验分组及条件培 养液制备 将培养孔按随机原则分 一 步提高 中医药防治肾小球疾病治疗水平提供依据 。 为 6组，每组 6孔。加入含 2．5％胎牛血 清的 RPMI～1640 1 实验材料与方法 液，培养24小时，使之转入休止期。分别施加以下不同的实 实验材料 实验动物 SD大 鼠 50只，雌雄各半，体重 验 因素 ，继续培养 48小时。 (180±20g)，由上海西普 尔 一必凯实验动物有 限公 司提供 ， 空 白组 ：加入含 l0％胎牛血清 的 RPMI一1640液 ；病理 SPF级 。SD大 鼠 10只，雄性 ，体重 (180±20g)，由上海西普 组 ：加入含 Ang1I×10 和浓度为 10％的大 鼠血清 ；消斑愈 尔 一必凯实验动