血凝和血凝抑制试验在家禽生产养殖中应用及存在的问题及解决方法.pdfVIP

禽类传染病一其他 血凝和血凝抑制试验在家禽生产养殖中的应用及存在的问题及解 决方法 李风华肖显悦王效禹江国托+ (大连三仪动物药品有限公司，辽宁大连，116036) 许多病毒(如正粘病毒科、副粘病毒科、披膜病毒科、细小病毒科及腺病毒科等的病毒)在其 囊膜表面具有血凝素能凝集鸡、豚鼠、人等红细胞，称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制， 称血凝抑制试验。这两个试验由于其简便、快速、灵敏等特点，目前在诊断和抗体监测等方面得到 了广泛的应用，但不规范的操作经常会发生一些问题，影响试验的准确性。笔者根据自己的实验经 历和文献报道现将其在家禽生产养殖中的应用情况和试验影响因素及解决方法说明如下。 1血凝和血凝抑制试验的临床应用 1．1用于病毒病的诊断 用于禽流感、新城疫、产蛋下降综合症、禽腺病毒、传染性支气管炎、禽脊髓炎等病毒的鉴定。 根据抗原与相应抗体的特异性中和反应原理，给未知病毒悬液中加入已知的抗禽流感病毒阳性血清 或其他具有血凝性的病毒阳性血清，相应病毒便丧失了其凝集红细胞的能力。因此，可利用从发病 的鸡、鸭、鹅体内分离的病毒作HA和HI试验。病毒悬液能凝集红细胞，并且能被已知的抗血清(阳 性血清)所抑制，那么该病毒即是已知阳性血清相对应的病毒。如用新城疫阳性血清完全抑制了未 知病毒培养物的血凝性，那么，这个未知病毒培养物就是新城疫病毒；如果病毒悬液虽然能凝集鸡 红细胞，但不能被鸡新城疫血清所抑制，说明不是鸡新城疫病毒，可能是其他有血凝性的病毒Ⅲ。 1．2 HI试验可用于发病禽群的诊断 鸡、鸭、鹅规模化养殖中虽进行相关疫病疫苗的免疫，但往往有部分家禽由于各种原因免疫力 水平达不到要求，冈而造成某些传染病的流行。由于免疫禽群发病时临床症状和病变不典型，给确 诊带来凼难。采用HI试验对禽群中禽流感、新城疫等抗体进行测定，依据抗体滴度的高低和离散性 有助于诊断。例如，经新城疫活苗加灭活苗免疫过的鸡群，新城疫抗体水平平均为7L92～8L92，最 鸡群抗体水平呈正态分布，HI抗体在10L92以上者仅占10％以下，4L92以下者在l％以下。而感染了 间。因此，依据禽群的抗体水平高低和分布，结合临床症状和病、死鸡的剖检变化，可诊断禽群是 否患有新城疫或禽流感等。 1．3血凝抑制试验常用于测定家禽血清中的抗体水平以及疫苗接种后的抗体效应，对禽群的免疫状 态进行评价。 禽群或个体血清中的HI抗体水平与具有血凝性的病毒疫苗的免疫和对相应强毒侵袭的抵抗力都 有密切关系。以新城疫为例，当HI抗体在7L92以上进行活苗免疫时，由于高抗体可中和绝大部分的 疫苗病毒，产生的免疫力很弱；HI抗体在5L92～6L92时，活苗免疫效果也受到一定的干扰；当HI抗 体在4L92以下时，活苗免疫效果良好，但对强毒感染抵抗力下降。一般认为，成年鸡新城疫的HI抗 80％以上的鸡易感染新城疫。 1．4用于残余抗体的检测 由于雏鸡母源抗体对疫苗首次免疫效果影响很大，了解母源抗体水平对疫苗免疫有重要意义。 研究表明，母鸡血清抗体、卵黄抗体和5H龄雏鸡母源抗体三者之间有相关性，卵黄 抗体与母鸡血清抗体基本一致，而1日龄雏鸡血清抗体低于卵黄抗体一个滴度，可检测种鸡卵黄 作者简介：李风华，女，汉族，1977年5月出生于黑龙江省富裕县，2001年毕业于黑龙江八一农垦大学。农学学士 学位，中级兽医师。2001年7月至今在大连三仪动物药品有限公司研究所工作。主要研究方向为重组动物细胞因子 的克隆表达及应用研究及蛋白质偶联技术的应用探索。近年来，获得大连市科技进步三等奖四项，大连市科技发明 奖二等奖一项。E．mail：li9203ll@sina．com。 第十三次学术研讨会会议论文集 抗体、估测1日龄雏鸡母源抗体水平。雏鸡新城疫母源抗体半衰期约为5天，免疫临界点为3L92，这 样可依据抗体水平，确定最佳免疫时间。 1．5检测高免血清或卵黄抗体效价，对其进行质量评价 采用m试验可测定新城疫、禽流感等高免血清或高免卵黄的抗体效价。当抗体水平在9L92以 上时，可用作紧急预防或早期治疗用生物制品。一般紧急预防时，每只家禽0．5～1．O毫升，用于治 疗时，每次每只家禽1．0毫升，必要时可重复注射1次。 2病毒血凝和血凝抑制试验影响因素及解决办法 2．1抗原浓度对m试验值的影响及解决办法 抗原