犬体弓首蛔虫rDNA+ITS的PCR扩增、克隆及其序列分析.pdfVIP

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2017-08-13 发布于安徽
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犬体弓首蛔虫rDNA+ITS的PCR扩增、克隆及其序列分析.pdf

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翼度麓斛麓赢林瑞庆何艳阳董嘉文陈虹虹李明伟宋慧群朱兴全 (华南农业大学兽医学院，广州 510642) 摘要：以保守引物NC5及NC2，运用PCR方法扩增了从广东广州犬体分离的弓首蛔虫 (Toxocara spp．)的rDNA的内转录间隔区(ITS)及5．8S序列。将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM—TEasy载体，用PCR及酶切鉴定阳性菌落，对阳性茵落质粒DNA进行测序。结果表明，ITS片段大小为964bp，包含ITS一1(484bp)、5．8S(157bp)及ITS一2 (323bp)序列。序列分析表明，该犬体的弓首蛔虫为犬弓首蛔虫。本项研究为进一步研究犬弓首蛔虫的分子生物学奠定了基础。关键词：内转录间隔区(ITS)，PCR，序列分析，犬弓首蛔虫 PCR and ofthe Amplification，ClleningSequenceAnalysis ITSand5。8SrDNAofToxocara spp。fromdogs Lin He Jiawen RuiqingYanyangDong Cheng Honghong Li Hu ZHUX Song Mingwei iqun ingquan of Medicine，SouthChina (CollegeVeterinary Agricultural 510642 China) University，Guangzhou internaltranscribed 5．8SrDNAof Abstract：The Toxocara spacer(ITS)and spp．isola— from was ted PCR a ofconserved Guangzhou，Guangdongprovinceamplifiedby usingpair andthe wereclonedinto vector．TheinsertswereSuccess— primers amplicons pGEM--TEasy theresultsrevealedthattheITSwere964 in fullysequenced，and andconsistedof bp length ITS一1(484 Toxocaraisolateswereidentified