生物反应器技术制备兽用狂犬病疫苗及其犬的免疫学效果观察.pdfVIP

塑曼堂堑．圭兰、堡旦丛筻理 分钟、30分钟、40分钟．50分钟、120讣钟灭莆． 皋，对照管为水黄色；若灭菌片培养维颜色不变仍为 1 5 2模拟正常生产装入带不锈钢盒的塑料疫苗瓶 浈紫色，为阴性(一)．表示灭菌彻底；如变黄为阳性 按照以上要求进行狐菌。 (+)．表示灭掏不彻底。(见2一结果与分析图表一 1 53将菌片放在(该芽孢苗片使用时币能破坏原 I)。 有的密封包装)装有疫苗瓶的不锈钢箱内灭菌。 2结果与分析 I 5．4灭苗后．在洁净取百缓层流罩下用眼科镊子 采用无菌操作将备时间段小纸袋中的茼片棱种于爵 通肉汤管内进行培莽。同时将来经灭菌的苗片和灭 菌120小时的菌片分别投入另外两套培养小管中培 养作对照。 1 55要求56℃一∞℃培养．(该菌为需氧芽孢轩 苗，细菌繁殖体c兰氏染色阴性呈紫包．细菌芽胞 孔雀绿着色：其细菌繁殖体对培养基要求低，在演 #}(1—7)$i十e月*gA 甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上生长良好，袭蔺粗糙呈 鼍焉嚣般i：：；祭”””“ 米黄色。最适生长繁殖温度为56—65℃，培养24h 即可形成蘸落．37℃下24h看不到菌落j)48h观察结 瞳热脂肪杆菌在Ⅲ菌柜内分布圈 目1 备注：“一’丧示朋性．。·”表示阳性 从上表我们可以看出．不管是120栅n还是 20rain、30nfia，40mln、50rain．12I℃、100Kp8进行灭菌 121℃、100K进行灭菌均能达到彻底灭菌的教果。 均能达到彻底灭菌的效果。 (2)根据此敬i式验结果，我们可以采用121℃、100K硼 3结论 灭菌柏耐n的方法，比原来的120蛐n缩短了80min． 通过此次试验可以得出以下结论： 太大的降低了脆耗成车．提高了工作效率。 生物反应器技术制备兽用狂犬病疫苗及犬的免疫学效果观察 查力，李彬．于海喜．石铁飞，殷建丈．高军．张小华．杨旭，庄九荣 Ⅱ宁成大动街药业有限公司．沈阳，110026 [摘要】 目的利用生协反应嚣．微载体高密度黉H胞培养技术．大规模生产普用狂犬府囊括疫苗厦犬免疫后的教果观 察。方法“巴斯德PV2061为生产毒种．“‘145北vem细胞为培养基质．利用生物反应器．每开投放茁克搬藏惟．采用湛流 式培养．连续收疆痛毒液。经翘磕浓缩、口一丙内酯业浦髓化加氢氧也铪佐剂吸附．制成兽用拄走病灭话佐剖疫苗．从此工 艺制备鹌疫苗中j壶出三批．作为实验室产品犬的免谴绶粜观察受试疫苗(^组)。另选一批“璃贝壤”狂犬确兽用佐荆x活疫苗 作为对熙痉苗(B组)。每组均按Imvn弃町量颈背肌内蛙射太各30只．观襄不复匣应和免疫应笞水平。结果所有免疫犬均 60IUlml和5％Iu／ 丰出现蔚部和全身剐反臆。免瑾后7天^组郸H组犬抗体融转率均为100％中和抗体几何平均值为6 ml；14夭为12o和12 511U／ml；28天抗体选到峰值为286和28$1U／ml。同时对受试组大卫进行长达2年抗体消长规律的研 究，结果显示．一次免疫．血清抗体可持续24个月“t．阳转睾仍为100％．抗体满座达刊1021U／ml。结论用生物反应器高密 ——663—— 生匪邀塑登型塑堂拦丝通韭邀墅堂继匡型塑鳖世勤迨型丝塑逝塑攀 ， 度细胞培养技术，制备的兽用狂犬病佐剂灭活疫苗，工艺技术先进，抗体诱导产生快，且具有良好的安全性、免疫原性和持久 的保护效果。 [关键词】兽用狂犬病疫苗；生物反应器；Veto细胞；