补益肝肾针法对脑缺血再灌注模型大鼠血浆中NPY含量的影响.pdfVIP

陕西中医 2009年第 3O卷第 6期 747 补益肝肾针法对脑缺血再灌注模型大鼠血浆 中NPY含量的影响 张小珊 杨孝芳 崔 瑾△ 吴高鑫 贵 阳中医学院针推系 (550002) 摘 要 目的：观测补益肝 肾针法对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠血浆 中NPY含量的影 响，探 讨其作 用机制。方法 ：将 大 鼠随机 分为假 手术组、模 型组、针 刺组 ，采用 改 良的 Zealonga法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ，电针肝俞、肾俞 ，分别于各种处理结 束后 6h、12h、24h对各组大鼠神经功能进行评分，观察脑组织形态学改变，测量脑梗塞面 积 ，血浆 中神经肽 Y(NPY)含量。结果 ：造模后 ，大鼠神经行为评分值升 高，梗塞面积扩 大，血浆 中NPY含量增加 ，脑组织病理结构 明显受损 。结论 ：以补益肝 肾为法的针刺肝 俞、肾俞可以保护缺血再灌注对脑组织的损伤 主题词 脑缺血 ／并发症 再灌注损伤／病 因学 再灌注损伤／针灸疗法 穴，肝俞 穴，肾俞 神 经肽 Y／血液 大鼠 动物 ，实验 脑卒 中是一种全球性疾病 ，研究表 明，脑缺血再灌注损伤 肾俞 ，常规消毒后 ，用直径为 0．22mm，长 13mm 的毫针 ，刺人 的主要机制包括 ：自由基生成增加 、兴奋性氨基酸毒性 、细胞 内 3mm左右 ，接通华佗牌 SD一Ⅱ型 电子针疗仪 ，留针 15min，采用 钙超载和NO 的神经毒性作用等诸多方面。目前研究发现神经 连续波 ，频率为 3Hz，强度 以大 鼠尾 巴轻微颤动为度 ，每 日1 肽Y(NPY)与脑血栓致梗死 的发生、发展有密切 的关系。NPY 次，针刺 1周 。针刺结束后开始造模 ，造模成功后 ，于缺血再灌 及其受体是广泛分布于哺乳动物脑和脑血管周 围，且认为在血 注 6h、12h、24h神经症状评分前用 同样方法再针刺 1次 。 浆和脑组织含量较高，具有强烈的收缩脑血管作用 。本研究通 2．3 大 鼠神经功能评定 采用 Longa等 四分法进行评 过针刺肝俞、肾俞对脑缺血再灌注损伤模型大 鼠血浆 中NPY 分 ：0分 ：正常活动；1分 ：不能充分伸展左前肢 ；2分 ：向左侧转 含量 的测定，以探讨针刺的抗脑缺血再灌注损伤作用 。 圈；3分 ：向左侧倾倒 ；4分 ：不能 自发行走，意识障碍 。评分 1～3 1 实验材料 分说 明造模成功。 1．1 实验动物及分组 雄性 SD大 鼠 99只，体重 250— 2．4 脑组织病理学切片观察(HE染色) 每组随机选一 300g，昆明医学院实验动物 中心所提供 。将大 鼠随机分为针刺 只大 鼠取脑 ，放入 20 福尔马林液中固定，乙醇脱水，石蜡包 组 (A组)、模型组 (B组)、假手术组 (c组)，每组 33只，每组再 埋 ，切片，常规 HE染色 。光镜下观察。图像资料采用贵阳医学 分再灌注后 6h、12h、24h三个时间点，每一时间点 11只。 院病理教研室 Biomias图像分析系统进行分析 。 1．2 试剂 NPY放免试剂盒 (解放军总医院科技开发 中 2．5 脑组织梗塞面积测定 (TTc染色) 将大 鼠断头取 心放免所)，红四氮唑 (北京化工厂)，10 水合氯醛 (贵阳中医 脑 ，剥离脑膜 ，将全脑置冰冷 的生理盐水 中(2～3℃)10min，去 学院针灸综合实验室)。 除嗅球 、小脑和低位脑干后 ，冠状切 四刀 ，切成五片。迅速将脑 1．3 仪器 3k30冷冻离心机 (Sigma公司)，毫针 (苏州针 片进行 TTC染色 。 灸用品厂)，华佗牌 电子针疗仪(苏州医疗用品有限公司)，多探 根据 “重量求面积法”，分别计算 出五个脑片总面积和梗 头放免仪(中国科大 中佳公司)。 塞区域