中性纤维素酶产生菌的筛选及其培育基的优化和酶学性质研究.pdfVIP

如 书ii.容杆‘学 2006年第“期 中性纤维素酶产生菌的筛选及其培养基的 优化和酶学性质研究 崔 玫，陈红漫，尚宏丽，孟 鑫，王晓丹 (沈阳农业大学酶工程中心，辽宁沈阳 110000) 摘 要:从造纸厂排水处附近采集土样，筛选得到1株产中性纤维素酶的芽抱杆菌。通过超声波破碎的方 法确定其为胞外酶，最适碳源为熬皮，最适氮源为蛋白脉，通过正交试验确定其液体发酵培养基的最佳组合为: 鼓皮1.5%，蛋白陈1%,NaCI025% ，M邓氏0.04%,KHZP0,1%.酶反应的最适温度为60`C，最适pH值70 关键词:芽抱杆菌;胞外酶;液体发酵培养基 中图分类号:S188 文献标识码:A 文章编号:0528-9017(2006)02-0214-04 自然界中能够降解和利用纤维素的微生物种类 并对它的发酵产酶最佳培养基以及酶学性质进行了 繁多，真菌、细菌、放线菌以及部分酵母菌等很多 初步探究。 主要的微生物类群中都有，但长久以来人们一直以 1材料与方法 产酸性胞外纤维素酶的木霉、曲霉等真菌作为主要 的研究对象。近年来，随着纤维素酶在洗涤剂、棉 1.1 材料 织品水洗抛光整理和制浆造纸等行业上的应用和发 1.1.1 土壤样品 展，使得由细菌产生的中性以及碱性纤维素酶得到 采集 自辽阳某一造纸厂排水处附近中性偏碱性 广泛重视，尤其是细菌产生的胞外纤维素酶拥有简 土壤。 化发酵工艺，节约资源的优势，正逐步显示出它良 1.1.2 培养基 好的使用性能和巨大的工业价值。 (1)筛选培养基A:蛋白陈10g,梭甲基纤维 作者从辽阳某一造纸厂废水排放口附近的土壤 素钠10g,NaCl5g,KHZP041g，琼脂18g，水 中分离得到1株产胞外中性纤维素酶的芽抱杆菌， 1000ml,pH值调至80 收稿日期:2005-11-15 作者简介:崔 玫 (1981一)，女，辽宁辽阳人，在读硕士研究生，从事酶工程与生物制药研究工作。 .州卜.州卜.州卜..州卜一 卜“叫卜.州卜·州卜..叫卜.州卜”州卜.州卜.州卜.叫卜一 卜一州卜.祠卜.州卜.州卜一~卜”叫卜..州卜.州卜· [2」 杨 著，孙黎光，白秀珍，等.异硫氰酸苯醋柱前衍生化反 4 结论 相高效液相色谱法同时测定18种氨基酸 i「l.色谱，2002, 20(4):369一371. 对文献报道的两种衍生方法进行了比较，结果 [3] 陈泽宪，徐辉碧.蛋白质水解阶段对氨基酸组成分析的影响 表明，方案一衍生步骤简单，降低了产生误差的概 [J].分析科学学报，2002,18(1):80一85 率，但缺点是天冬氨酸、谷氨酸和半胧氨酸不能被 [4] RobertL,etal.AminoAcidAnslysisbyReverse-PhaseHigh- 衍生;方案二 18种氨基酸都可被衍生，但衍生步 PerformanceLiquidChromatography:PrecolumnDerivatizationwith 骤繁琐，不过只要各个步骤都谨慎而准确，仍然可 Phenylisothiocyanate J〔].AnalyticalBiochemistry,1984,136: 65一74. 以获得很理想的结果。因此，可根据不同的实验要