竹黄菌液体培育条件下生成竹红菌素的研究.pdfVIP

维普资讯 技 术 2004，11(5)：299~ 301 299 竹黄菌液体培养条件下生成竹红菌素的研究 石贵阳，张大兵 ，楼志华。，蔡宇杰。 (1．江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214036~ 2．江苏汉邦科技有限公司，江苏 淮安 223001；3．江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214036) 摘 要 研究了竹黄菌液体培养生成竹红菌素过程中培养条件的影响。结果表明竹黄菌生长及竹红菌素 生成适宜的温度、pH值分别为26℃、5．5～6．0，并且整个过程需要充分的溶氧。液体培养的最适碳源为葡萄 糖，浓度为 30g／L。最适氮源为土豆汁，浓度为2O％。 关键词 竹黄；竹红菌素；液体发酵 中图分类号：TQ927 文献标识码 ：A 文章编号：1005—8915(2004)05—0299—03 竹红菌素是药用真菌竹黄菌(Shiraiabarnbu— 竹黄菌LBR-SB6，本实验室保藏 sicolaHenn)的主要成分之一。在医学界将其用 1．2 培养基 于外阴白色病变[1]、软化疤痕疙瘩[2]以及皮肤淀粉 斜面培养基(96／)：土豆汁 20(以鲜土豆块重量 样变苔藓、牛皮癣等[3]皮肤病治疗。而对小鼠和大 计)，葡萄糖 1，KH2PO40．2，MgSO47H2O0．05， 鼠所进行的镇痛和抗炎实验 ]均表明竹红菌素具 琼脂 2，pH值 自然。 有明显的抗炎镇痛功效，这为临床用于治疗胃痛、 发酵培养基(96／)：土豆汁 20(以鲜土豆块重量 风湿性关节炎、跌打损伤以及坐骨神经痛等疾病提 计)。葡萄糖 2，KH2PO40．2，MgSO．,·7H2O 供了药理基础，也是我国民间用于治疗类似疾病取 0．05，pH值 自然。其它视实验需要而定。 得较好疗效的原因所在。 1．3 培养条件 竹红菌素是多种茈醌类衍生物的混合物_5．6]，在 斜面种子28~C活化24h后接人 500ml三角瓶 自然界中不同种属的许多真菌都能产生具有茈醌骨 (装液量 100m1)，摇床转速120r／rain，培养168h。 架的代谢产物[7]，而近年来研究工作多集中在尾孢 1．4 分析方法 素和金丝桃蒽酮等的光动力学和立体化学上。和它 1．4．1 细胞干重 发酵液于 3000r／min的转速 们相比，竹红菌素具有稳定性好，口服无明显副作 下离心 15min，倾去上清液，收集菌体用蒸馏水洗 用，代谢快，溶于众多有机溶剂而不溶于水等一系列 涤后，再次离心去除上清液。将菌体在一20~C冷冻 特点。作为一种重要的天然光敏色素，竹红菌素在 2h后，真空干燥至恒重后称重。 医药和食品领域等有着巨大的潜在应用价值。 1．4．2 葡萄糖DNS法[。 但长期以来竹红菌素的研究来源仅限于野生 1．4．3 竹红菌素含量的测定 将一定量的菌丝体 竹黄。近年来也有文章研究了固态培养竹黄嘲，和 与一定比例的丙酮混合，浸提 60min，浸提后用滤 传统的固体栽培生产菌素相比，液体发酵具有生产 纸、脱脂棉依次将提取液过滤，得到澄清色素溶液， 周期短、成本低、易实现工业化生产的优点。先前 用丙酮稀释若干倍后 ，采用分光光度法在 (464 的研究表明，竹黄深层培养菌丝的主要成份为茈醌 ±1)nm波长处测定吸收度_1，根据标准曲线回归 类竹红菌素，本文进一步研究了液体培养竹黄过程 方程Y一3．2x+0．022计算竹红菌素的含量，其中 中营养条件对竹红菌素生成的影响。 X为吸光度 ，Y为竹红菌素量。 1 材料与方法