色素提取和分离.pptVIP

下页退出上页上页退出下页退出上页退出色素提取和分离第1页，共21页，星期日，2025年，2月5日色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一，它的分离效果比分馏、重结晶等一般的物理方法好，适用于少量和微量物质的分离。这一方法已在化学、生物学和医学中得到了普遍应用，广泛用于天然产物的分离和提纯。第2页，共21页，星期日，2025年，2月5日绿色植物中色素的提取和分离实验目的实验原理试剂及仪器实验步骤注意事项返回第3页，共21页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的1.学习从植物中提取色素的方法。2.学习薄层色谱(层析)和柱色谱(层析)的原理及其操作方法。返回第4页，共21页，星期日，2025年，2月5日二、实验原理返回叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素极性次序为何？提问绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。通过柱色谱(层析)和薄层色谱(层析)对菠菜叶中的上述几种色素进行分离。第5页，共21页，星期日，2025年，2月5日叶绿素a(R=CH3)叶绿素b(R=CHO)β-胡萝卜素(R=H)叶黄素(R=OH)返回第6页，共21页，星期日，2025年，2月5日吸附色谱是以氧化铝、硅胶等为吸附剂，将一些物质从溶液中吸附到它的表面上；然后用溶剂洗脱或展开，利用不同物质在吸附剂和溶剂之间分布情况不同而得到分开。如柱色谱和薄层色谱。分配色谱是利用混合物的组分在2种互不相溶的液体中分布情况不同而得到分离。这样的分离不经过吸附程序，仅由溶剂的萃取来完成，相当于一种连续性溶剂萃取方法。色谱法分为吸附色谱和分配色谱2类返回第7页，共21页，星期日，2025年，2月5日薄层色谱薄层色谱是一种微量、快速和简单的色谱方法，用于分离、纯化和鉴定有机化合物。优点是展开时间短、分离效率高和需要样品少(几微克)，特别适用于挥发性较小，或者在较高温底下易发生变化，不宜用气相色谱分离的化合物。薄层色谱为固—液吸附色谱。样品是在薄层板上的吸附剂(固定相)和展开剂(流动相)之间进行分离。吸附剂对各种化合物的吸附能力不同，在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。返回第8页，共21页，星期日，2025年，2月5日吸附剂薄层色谱中常用的吸附剂是硅胶和氧化铝。其中硅胶分为硅胶G(含有煅石膏粘合剂)、硅胶H(不含粘合剂)、硅胶HF254(含荧光物质)。氧化铝也根据含粘合剂或荧光物质分为氧化铝G、氧化铝GF254、氧化铝HF254。展开剂薄层色谱的展开剂主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性来考虑。溶剂极性越大，对化合物的洗脱力也越大。薄层色谱的展开要在密闭的容器内进行。返回第9页，共21页，星期日，2025年，2月5日1：薄层板为什么要活化？2：在混合物的薄层色谱中，如何定性的判定各组分在薄层上的位置。返回提问薄层色谱的展开第10页，共21页，星期日，2025年，2月5日Rf值(比迁移值)比迁移值是表示色谱图上斑点相对位置的一个数值。各种物质的Rf值因其结构、吸附剂种类、展开剂、温度等不同而异。当上述条件固定时，对于一个物质来说比迁移值(Rf值)是一个特性常数，可以用来鉴别不同化合物，还可用于物质的分离和定量测定。dAdS溶质的最高浓度中心至原点中心的距离溶剂前沿至原点中心的距离返回第11页，共21页，星期日，2025年，2月5日柱色谱是通过色谱柱来实现分离的。在色谱柱内装有固体吸附剂(固定相)如氧化铝或硅胶。液体样品从柱顶加入，当液体流经吸附剂时，由于吸附剂表面对液体中各组分吸附能力不同而按一定的顺序吸附。然后从柱顶加入洗脱剂(流动相)，样品中的各组分随洗脱剂按一定的顺序从色谱柱下端流出，根据不同颜色分段收集。如为无色物质，可用紫外光照射，收集会发出荧光的组分；否则就要采取分段收集洗提液，再分别进行鉴定。柱色谱返回第12页，共21页，星期日，2025年，2月5日柱色谱原理：混合物洗脱剂返回第13页，共21页，星期日，2025年，2月5日吸附剂常用吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁等。吸附剂对化合物的吸附能力与分子的极性有关，极性越强，吸附能力越大，分子中含有极性较大的基团，其吸附能力也越强。酸、碱醇、胺、硫醇酯、醛、酮芳香族化合物卤代物、醚烯烃饱和烃氧化铝对下列化合物的吸附性：返回第14页，共21页，星期日，2025年，2月5日溶剂溶剂分为溶解样品的溶剂和洗脱剂。选择溶剂时还要考虑到被分离物各组分的极性和溶解度。通