蛋白质化学总论和氨基酸.pptVIP

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巯基(-SH)的反应

-侧链基团的反应(与重金属反应)作用:与金属离子的螯合性质可用于体内解毒第95页,共128页,星期日,2025年,2月5日巯基(-SH)的反应

-侧链基团的反应作用:氧化还原反应可使蛋白质分子中二硫键形成或断裂。巯基的氧化及二硫键的还原第96页,共128页,星期日,2025年,2月5日巯基(-SH)的反应

-侧链基团的反应+6HCOOH6HCOOOH作用:氧化还原反应可使蛋白质分子中二硫键断裂。二硫苏糖醇(DTT)也可以用来打开胱氨酸上的二硫键。DTT第97页,共128页,星期日,2025年,2月5日巯基(-SH)的反应

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-侧链基团的化学性质二异丙基氟磷酸酯,DFP、DIPF、DIFP+HF作用:可用于修饰蛋白质。第99页,共128页,星期日,2025年,2月5日氨基酸的酸碱滴定曲线1molGly溶于水时,溶液的pH约为6,用标准NaOH进行滴定的滴定曲线。第63页,共128页,星期日,2025年,2月5日MultipleTitrationCurves第64页,共128页,星期日,2025年,2月5日氨基酸的碱滴定及解离反应方程pK1pK2K1=[+H3NCH2COO-][H+]/[+H3NCH2COOH]K2=[H2NCH2COO-][H+]/[+H3NCH2COO-]第65页,共128页,星期日,2025年,2月5日氨基酸等电点及解离百分数的计算公式:pH=pK+lg([质子受体]/[质子供体]),可定量计算氨基酸在某一pH条件下的解离百分数。氨基酸等电点pI值是由兼性离子两侧基团的pK值所决定的。eg:GlyK1=[+H3NCH2COO-][H+]/ [+H3NCH2COOH]K2=[H2NCH2COO-][H+]/ [+H3NCH2COO-] pH=pI时,+H3NCH2COOH=H2NCH2COO-K1K2=[H+]22pH=pK1+pK2pH=(pK1+pK2)/2pI=(pK1+pK2)/2同理对含三个可解离基团的氨基酸来说,只要写出它的电离式,然后取兼性离子两边的pK值的平均值,即得其pI值。第66页,共128页,星期日,2025年,2月5日氨基酸等电点的计算侧链不含离解基团的中性氨基酸,其等电点是它的pK1和pK2的算术平均值:pI=(pK1+pK2)/2pHpI,带正电;pH=pI,不带净电;pHpI,带负电。第67页,共128页,星期日,2025年,2月5日同样,对于侧链含有可解离基团的氨基酸,其pI值也决定于两性离子两边的pK值的算术平均值。酸性氨基酸:pI=(pK1+pKR-COO-)/2第68页,共128页,星期日,2025年,2月5日碱性氨基酸:pI=(pK2+pKR-NH2)/2 二十种基本氨基酸,除His外,在生理pH(pH7附近)下都没有明显的缓冲容量,因为这些氨基酸的表观解离常数都不在pH7附近,缓冲容量只有在接近表观解离常数值时才表现出来。His咪唑基的解离常数为6.0,在pH7附近有明显的缓冲作用。血红蛋白含有较多的His残基,在pH7左右的血液中具有明显的缓冲能力,对运输氧和二氧化碳重要。第69页,共128页,星期日,2025年,2月5日肽及蛋白质的等电点计算第70页,共128页,星期日,2025年,2月5日计算KK和KKK的等电点,已知pKa=2.18,pKb=8.95,pKλε=10.53。KK(3+)→KK(3+,-)→KK(2+,-)→KK(1-)2.188.9510.53KKK(4+)→KKK(4+,-)→KKK(3+,-)→KKK(1-)2.188.9510.53等电点时,K的ε的电荷为+1, pIkk=10.53+log1/1=10.53

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