移植免疫及其免疫检测.pptxVIP

;移植〔transplantation〕是指将健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以替代或补偿机体所丧失的结构和〔或〕功能的现代医疗手段。被移植的细胞、组织或器官称移植物〔graft〕，提供移植物的个体称为供体(donor)，接受移植物的个体称为受体〔recipient〕。;;移植名称 供者、受者关系 举例

自体移植 同一个体 自体皮片移植

同系或同基因移植同系或同基因人的单卵双生子间的器官移植

的个体间同品系小鼠的皮片移植

同种异基因移植同种不同基因人与人之间的肾移植

的个体间不同品系小鼠间的皮片移植

异种移植异种动物间 狗的器官移植给猩猩

猪的器官移植给狗;第一节器官移植与移植免疫的特点;一、器官和组织移植的一般规律;二、HLA是诱导排斥反响最强的靶抗原;HLA是人体多态性最丰富的基因系统。;HLA分型要比ABO血型复杂的多，每个人不是从父母分别得到一个

基因，而是得到一串基因(HLA单倍型)。每人遗传到二串“冰糖葫芦，其上的“红果〞(基因)以A、B、C、D、DR、DQ和DP为序。

A有28种红果(分别记为A1、、A2、A3、A9...)，

B有61种(记为B5、B7、B8、B12...)，

DR有24种(记为DR1、DR2、DR3、DR4...)等。

七彩红果共有164种编号，如不同遗传排列的红果随机组合，按理论推算，“冰糖葫芦〞有五亿多种变化，能组合33亿多种HLA分型。

理论推测的HLA分型数量巨大，但对一个具体的民族来说并非如此。;在三类HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ类分子是触发移植排斥反响的首要抗原，尤其是HLA-DR位点的抗原分子;第二节HLA配型与应用分析;〔一〕血清学分型法;用于HLA分型的微量细胞毒试验;死（着染）细胞（%）;〔二〕细胞学分型法;;遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合培养时，由于两者HLA不同，能相互刺???导致对方淋巴细胞增殖，故称双向MLC。在此试验中，各自的淋巴细胞既是刺激细胞，又是反响细胞，反响后形态上呈现的细胞转化和分裂现象，可通过形态法计数转化细胞。;〔三〕分子生物学分型法;;序列特异性寡核苷酸-聚合酶链反响〔PCR-sequencespecificoligonucleotide,PCR-SSO〕是以PCR为根底，将凝胶上扩增的HLA基因DNA转移至硝酸纤维膜或尼龙膜，进而用放射性核素或酶、地高辛等非放射性物质标记的寡核苷酸探针与之进行杂交，从而对扩增产物作出HLA型别判断。;分类：

斑点或印渍法反向斑点或印渍法;;原理：应用设计的一套HLA等位基因的序列特异性引物〔sequencespecificprimer,SSP〕,对待测DNA进行PCR扩增，从而获得HLA型别特异性的扩增产物;4.PCR-SSCP分型法;原理：对ssDNA进行无变性剂的聚丙烯酰凝胶电泳时，因其序列的差异可形成不同的空间构象而导致电泳迁移率的差异，如此可分辨出单一碱基的差异和检测出DNA多态性或点突变，有助于新的HLA等位基因或突变体的发现。;根本过程：别离待测细胞的DNA，应用座位、组或等位基因特异性引物进行PCR扩增，扩增产物的纯化和测序，测出的基因序列与HLA基因库的DNA序列比较，判断待测的HLA型别。;二、HLA分型方法的应用;;〔二〕HLA交叉配型与预存抗体的检测

移植前如果受者血清中预先存在抗供者淋巴细胞的细胞毒性抗体，移植后80%发生超急性排斥反响，因此必须做HLA交叉配型以检测受者体内抗供者淋巴细胞的细胞毒性抗体。

1.淋巴细胞交叉配合试验：检测受者是否有抗供者的特异性抗体，LD抗原