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流动相极性变化对分离的影响0%甲醇2%甲醇5%甲醇1:邻苯二甲酸二辛酯2:邻苯二甲酸二丁酯3:邻苯二甲酸二乙酯4:邻苯二甲酸二甲酯主要试剂:己烷第31页，共37页，星期日，2025年，2月5日反相色谱流动相极性大于固定相极性适用于能溶于水/有机混合物的中性或非离子化合物分离正相色谱流动相极性小于固定相极性适用于不溶于水/有机混合液的亲脂样品、异构体混合物的分离和制备HPLC反相色谱与正相色谱的对比第32页，共37页，星期日，2025年，2月5日反相保留时间重现性好固定相耐用正相对立体异构体有很好的分离（VitaminE等）保留时间重现性稍差反相色谱与正相色谱的对比第33页，共37页，星期日，2025年，2月5日离子交换色谱原理：利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离固定相：离子交换树脂流动相：水缓冲溶液（常用）或有机溶剂与水缓冲溶液的混合液离子交换色谱所用的缓冲液：阴离子分离：氢氧化物、硼酸盐、碳酸盐、酚盐和两性离子等阳离子分离：矿物酸，如硝酸、盐酸、硫酸和甲基磺酸等第34页，共37页，星期日，2025年，2月5日N+RRR样品SO3-样品+++++++++++++离子吸引力离子交换色谱作用力第35页，共37页，星期日，2025年，2月5日离子交换色谱应用生物领域（蛋白质,农药,氨基酸分析）离子分析阳离子交换剂强阳离子交换剂（SCX）（R-SO3-）弱阳离子交换剂（WCX）（R-COO-）阴离子交换剂强阴离子交换剂（SAX）（R4N+）弱阴离子交换剂（WAX）（DEAE）第36页，共37页，星期日，2025年，2月5日原理：利用多孔凝胶固定相的独特特性，而产生的一种主要依据分子尺寸大小的差异来分离的液相色谱方法固定相：一种表面惰性、具有一定孔径的多孔凝胶应用：聚合物及生命科学领域尺寸排阻色谱法（SEC）第37页，共37页，星期日，2025年，2月5日**俄国植物学家茨维特，1903年，植物绿叶的石油醚萃取液，流动相-石油醚，在碳酸钙上形成了一圈一圈的色带*光色谱是近年来发展起来的利用辐射力和介质流体分离粒子的新技术，应用于分离和测定粒子大小及生物化学研究。光色谱分离的原理是依据激光辐射压力与被分离离子半径的平方成正比而对不同尺寸的离子进行拆分。光色谱是指以激光的辐射压力为色谱分离的驱动力,在毛细管中将待分离组分(或粒子)按几何尺寸的大小予以分离的技术。电色谱又叫毛细管电色谱(CEC)以内含色谱固定相的毛细管为分离柱,以电渗流为驱动力,既可以分离带电物质也可以分离中性物质.它结合了毛细管电泳和高效液相色谱两者的优点,兼具高柱效、高分辨率、高选择性和高峰容量的特点,同时具有色谱和电泳的双重分离机理.*添加手性分离（Chiral)顺序统一*****Si---SiO2***5-100mmol****ShimadzuInternationalTrading(Shanghai)Co.Limited液相色谱原理基础知识第1页，共37页，星期日，2025年，2月5日免费咨询电话 800-810-0439 400-650-0439分析中心电话 北京：010 上海：021 广州：020 沈阳：024岛津网站地址 耗材购买电话 800-820-7730【岛津技迩（上海）商贸有限公司】有任何问题请联系我们第2页，共37页，星期日，2025年，2月5日1969 GPC系统开发1972 LC-1（LC-830）销售＜与DuPont签订许可合同后制造销售＞1978 LC-3A系列销售＜CDQR方式的单柱塞型送液单元为特征＞1981 LC-4A系列销售＜内置微型计算机的全自动HPLC＞1982 LC-5A