基于微阵列数据的circRNA-miRNA-mRNA竞争性内源RNA网络构建及其与自身免疫性肝炎小鼠模型肝损伤的相关性分析.pdfVIP

878临床肝胆病杂志第41卷第5期2025年5月JClinHepatol，Vol.41No.5，May.2025

·自身免疫性肝病·DOI：10.12449/JCH250513

基于微阵列数据的circRNA-miRNA-mRNA竞争性内源RNA网络

构建及其与自身免疫性肝炎小鼠模型肝损伤的相关性分析

郭地，刘莹，刘杨

山西中医药大学基础医学院，山西晋中030619

通信作者：刘杨，liuyang1980@sxtcm.edu.cn（ORCID：0000-0002-6627-5002）

摘要：目的构建环状RNA（circRNA）-微小RNA（miRNA）-信使RNA（mRNA）竞争性内源RNA（ceRNA）网络，探讨其在刀

豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎（AIH）小鼠模型中的潜在调控机制，并验证关键基因的表达与肝损伤的关系。方法使用

高通量数据筛选差异表达的circRNA、miRNA和mRNA，基于Pearson相关分析和Miranda程序预测miRNA与mRNA及

circRNA的配对关系，构建ceRNA网络。对网络中的差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。选取SPF级雄性C57BL/6

小鼠12只，采用随机数字表法分为对照组和模型组，每组6只，模型组通过尾静脉注射刀豆蛋白A构建AIH小鼠模型，对照

组注射生理盐水。通过qRT-PCR和WesternBlot方法验证circ_0001577、miR-7055-3p和Akt3的表达。测定血清转氨酶

（ALT、AST）和肝组织中丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）含量，并分析其与基因表达的相关性。计量资料两组间比较采用成

组t检验。使用Spearman相关分析法分析基因表达与肝损伤指标之间的相关性。结果构建了包含5795个circRNA-

miRNA-mRNA配对的ceRNA网络，发现circ_0001577为中心基因。与对照组小鼠比较，模型组中的circ_0001577和Akt3表

达上调，miR-7055-3p下调，差异均有统计学意义（P值均0.05），且circ_0001577与Akt3呈正相关（r=0.861，P0.001），miR-

7055-3p与两者呈负相关（r值分别为−0.644、−0.855，P值均0.05）。模型组小鼠肝脏Akt3蛋白表达显著高于对照组（1.04±

0.10vs0.72±0.06，t=−6.49，P=0.001），并与circ_0001577呈正相关（r=0.579，P=0.048），与miR-7055-3p呈负相关（r=−0.891，P

0.001）。模型组小鼠血清ALT、AST和肝组织MDA、NO含量较对照组均显著增加（P值均0.05），上述肝损伤指标与circ_

0001577、Akt3呈正相关（r值分别为0.849、0.865、0.811、0.801；0.889、0.954、0.938、0.961，P值均0.05），与miR-7055-3p呈负

相关（r值分别为−0.687、−0.818、−0.833、−0.870，P值均0.05），且与Akt蛋白表达呈正相关（r值分别为0.648、0.796、0.848、

0.860，P值均0.05）。结论circ_0001577通过竞争性吸附miR-7055-3p，导致Akt3抑制被解除，进而促进Akt3的表达，参与

AIH的发生发展。circ_0001577及其相关通路可能成为AIH的潜在治疗靶点。

关键词：肝炎，自身免疫性；RNA，环状；微RNAs；RNA，信使；小鼠，近交C57BL

基金项目：国家中医药管理局高水平中医药重点学科建设项目（2024）；中西医结合防治风湿免疫病山西省科技创新人才

重点团队（202204051002033）；山西省科学技术厅山西省重点国别科技合作项目（202104041101013）；山西省应用基础研

究计划青年科学基金项目（202203021222272）；山西省中医药管理局科研项目（2024ZYYAD008）；山西中医药大学科技创

新团队项目（2022TD2