临床免疫学检验-名词解释与重要知识点-(上).pdfVIP

抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。

抗原抗体间的结合力涉及争电引力、范华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强,

它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。

亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合

强度，取决于两者空间结构的互补程度。

亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合

强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。

抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。

带现象（zonephenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于

抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应

现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。

免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。

免疫佐剂（immunoadjuslvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强

机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。

半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力抗（原性），而单独不能诱

导抗体产生（无免疫原性）的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。

载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质,

载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半

抗原的免疫应答，该现象称为〜。

单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克

隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。

多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质

刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋

白,即~

基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因

进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。

杂交瘤技术

【原理】以聚乙二醇PEG）为细胞融合剂，使免疫后能产生抗体的小鼠脾细胞与能在体外

长期繁殖的小鼠骨髓瘤细抱融合产生杂交瘤细胞，通过次黄喋吟、氨基蝶吟和胸腺嗑噪核首

HAT）选择性培养基的作用，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经反复的免疫学检测筛选

和单个细胞培养克隆化），最终获得机能产生所需单克隆抗体又能长期体外繁殖的杂交瘤

细胞系。将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价的单克隆抗体。

一）小鼠骨髓瘤细胞

理想骨髓瘤细胞的条件：①细胞株稳定，易于传代培养：②细胞株本身不产生免疫球蛋白或

细胞因子；③该细胞是HGPRT或TK的缺陷株；④能与B细胞融合成稳定的杂交瘤细胞；

⑤融合率高。

目前最常用的是NS-1和SP2/O细胞株

-）免疫脾细胞

多采用与骨髓瘤细胞同源的纯系BALB/c小鼠；免疫途径多为腹腔内或皮内多点注射法。若

抗原微量，可用脾脏内直接注射法进行免疫。细胞性抗原不需加佐剂，可溶性抗原需加完全

弗氏佐剂。

三）细胞融合

是产生杂交瘤细胞的中心环节。一般用分子量1000D、1500D、4000DPEG作细胞融合剂，

浓度30~50%之间，基本方法是将骨髓瘤细胞与脾细胞按1:2~1:10比例混合，加入PEG,

诱导两种细胞融合，时间控制在2min以内，再加入培养液缓慢稀释PEG融合液，直至失去

融合作用，融合细胞形成具有两个或多个核的异核体，最终产生杂交细胞。

四）杂交瘤细胞的选择性培养

肿瘤细胞合成DNA有两条途径：一条为生物合成途径，可被叶酸拮抗物氨基蝶吟）阻断;

另一条为替代途径，叶酸代谢受阻时，细胞通过HGPRT和TK,利用核甘酸前体物合成核

甘酸，进而合成DNA。HAT培养液含三种成分：次黄嚎吟H）、氨基蝶吟A）和脑腺喘

咤核首T）,经HAT培养液筛选后，只有具备两亲本细胞双重特性的杂