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开始转录(Pribnowbox)TATAATPuATATTAPy-10区1-30-5010-10-40-205?3?3?5?原核生物启动子的保守序列TTGACAAACTGT-35区RNA-pol辨认位点(recognitionsite)5?5?RNA聚合酶保护区结构基因3?3?第31页,共77页,星期日,2025年,2月5日原核生物转录起始区的一致性序列第32页,共77页,星期日,2025年,2月5日被RNA聚合酶辨认的区段就是位于转录起始点-35区的TTGACA序列。RNA聚合酶与该区结合后,即滑动至-10区的TATAAT序列(Pribnow盒),并启动转录。第33页,共77页,星期日,2025年,2月5日RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合第34页,共77页,星期日,2025年,2月5日⑵DNA局部双链解开。⑴RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合。⑶在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物。RNApol(?2????)-DNA-pppGpN-OH3?转录起始复合物:5?-pppG-OH+NTP?5?-pppGpN-OH3?+ppi2.转录的起始过程:第35页,共77页,星期日,2025年,2月5日?因子从全酶上脱离,余下的核心酶继续沿DNA链移动,按照碱基互补原则,不断聚合RNA。1.?亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移;2.在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。(二)转录延长(NMP)n+NTP??(NMP)n+1+PPi第36页,共77页,星期日,2025年,2月5日RNA转录的延长第37页,共77页,星期日,2025年,2月5日转录空泡(transcriptionbubble)的形成第38页,共77页,星期日,2025年,2月5日原核生物转录过程中的羽毛状现象第39页,共77页,星期日,2025年,2月5日RNA转录合成的终止机制有两种:1.依赖Rho因子的转录终止:由终止因子(?因子)识别特异的终止信号,并促使RNA的释放。(三)转录终止第40页,共77页,星期日,2025年,2月5日ATP依赖Rho因子的转录终止第41页,共77页,星期日,2025年,2月5日模板DNA链在接近转录终止点处存在相连的富含GC和AT的区域,使RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构,引起RNA聚合酶变构及移动停止,导致RNA转录的终止。2.非依赖Rho的转录终止:第42页,共77页,星期日,2025年,2月5日5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`RNA5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3?DNAUUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构第43页,共77页,星期日,2025年,2月5日茎环结构使转录终止的机理使RNA聚合酶变构,转录停顿;使转录复合物趋于解离,RNA产物释放。第44页,共77页,星期日,2025年,2月5日二、真核生物的转录过程1.转录起始的上游区段:真核生物的转录起始点上游-25bp区也存在一段富含TA的顺序,被称为Hogness盒或TATA盒,通常认为是启动子的核心序列。(一)转录起始第45页,共77页,星期日,2025年,2月5日除此之外,在真核生物中还可见到其他带共性的序列,如CAAT盒及GC盒等。在远离受控基因处存在的,能够增强基因转录活性的调控序列称为增强子(enhancer)。第46页,共77页,星期日,2025年,2月5日真核生物启动子保守序列第47页,共77页,星期日,2025年,2月5日真核生物转录起始时,首先由TFⅡD的TBP亚基识别并结合TATA盒,然后在其他转录因子的配合下,与RNA聚合酶Ⅱ组装形成转录起始前复合物(pre-initiationcomplex,P
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