第5章免疫血清学检验技术.pptVIP

簇分化抗原（Clusterofdifferentiation，CD）。***四甲基联苯胺TMB；5-氨基水杨酸5-ASA；2,2′-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐ABTS；邻苯二胺OPD；；对-硝基苯磷酸酯（pNPP）4-甲基伞酮基β-D半-乳糖苷（4MUG）******阳性阴性固相膜固相抗原待测抗体金标记抗人IgG抗体人IgG固相抗人IgG抗体IFA--双抗体夹心法原理图三、斑点金免疫渗滤试验dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA/IFA第95页，共103页，星期日，2025年，2月5日金洗样IFA--快速检测（渗滤法）示意图第96页，共103页，星期日，2025年，2月5日ICA--间接法测抗体ICA--双抗体夹心法测抗原四、免疫层析试验immunochromatographyassay,ICA样品垫结合物垫NC膜吸水垫第97页，共103页，星期日，2025年，2月5日阳性阴性无效ICA结果观察第98页，共103页，星期日，2025年，2月5日第99页，共103页，星期日，2025年，2月5日五、斑点酶免疫吸附试验

dotenzymelinkedimmunosorbentassay,Dot-LISA第100页，共103页，星期日，2025年，2月5日六、酶联免疫斑点试验enzymelinkedimmunospot,ELISPOT细胞受到刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后，被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了细胞因子，通过CTL公司生产的ELISPOT酶联斑点分析系统对斑点的分析后得出结果。第101页，共103页，星期日，2025年，2月5日第102页，共103页，星期日，2025年，2月5日ELISPOT结果判断第103页，共103页，星期日，2025年，2月5日*有些细菌即使用生化反应很难区别，但其细菌抗原成份（包括菌体抗原、鞭毛抗原）却不同。利用已知的特异抗体测定有无相应的细菌抗原可以确定菌种或菌型；检测抗原的另一优点为在应用了抗生素治疗后，细菌生长被抑制，利用培养方法不能检出的细菌，如果在短期内检出抗原，将有助于明确病因；个别情况下还可利用噬菌体对细菌抗原型别分析，用于流行病学追踪调查。*Supernatants，上清液；myoglobin，肌红蛋白；polyclonalantiserum，多克隆抗体；**肥达氏试验(Widaltest)，伤寒或副伤寒的诊断；外裴二氏试验(Weil-felixtest)，斑疹伤寒及恙虫病的诊断；瑞特氏实验(Wrighttest)，布鲁氏菌病的及诊断。布鲁菌病(brucellosis，布病)，也称波状热，是布鲁菌引起的急性或慢性传染病，属自然疫源性疾病，临床上主要表现为病情轻重不一的发热、多汗、关节痛等。传染源羊在国内为主要传染源，其次为牛和猪。病菌可由皮肤、消化道、呼吸道粘膜、眼结膜和性器官粘膜进入体内。*SPA：葡萄球菌A蛋白质（staphylococcalproteinA，SPA），多数金黄色葡萄球菌细胞壁内含有的一种特殊蛋白质。一个分子内有4个相似的活性部位，能与人及多种哺乳动物（猪、兔、豚鼠等）血清中IgG类抗体的FC段非特异性结合。*Coombs试剂：抗人球蛋白*Coombs试剂：抗人球蛋白*有时出现扩散圈呈两重沉淀环的双环现象。这是由于出现了不同扩散率、但抗原性相同的两个组分*电渗：电场中溶液相对于固体的移动。琼脂是酸性物质，在碱性溶液中带负电，而与它接触的溶液带正电，因此液体向阴性移动。抗原抗体进行对流，在比例合适处形成沉淀线。*放射免疫RIA以标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争结合特异性抗体来测定待检样品中抗原量。免疫放射IRMA以过量标记抗体与抗原非竞争结合，采用固相免疫吸附载体分离游离和结合标记抗体。*⑴平衡法：将非标记抗原（被测物与标准品）、抗体、标记抗原依次加入反应管，混匀后一次性温育至反应达到动态平衡，再加分离剂分离B（复合物）与F（游离物）如：AFP，8-MG，Fer；⑵顺序加样法：先将非标记抗原（被测物与标准品），与抗体在反应管内作第一次温育，待反应达到动态平衡后。加入标记抗原，再作第二次温育后，分离B与F。如：CEA；急诊检测法：为临床急需检测结果而提出的反应方式，不等RIA反应达到动态平衡就终止反应；⑶分离