生化第10章DNA的生物合成.pptVIP

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功能?维持染色体的稳定性?维持DNA复制的完整性结构特点?由末端DNA序列和蛋白质构成。?末端DNA序列是多次重复的富含G、T碱基的短序列。TTTTGGGGTTTTGGGG…端粒(telomere)指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。端粒酶(telomerase)端粒酶是一种RNA-蛋白质复合体,它可以其RNA为模板,通过逆转录过程对末端DNA链进行延长。端粒酶的分子结构端粒酶(telomerase)端粒酶RNA(humantelomeraseRNA,hTR)端粒酶协同蛋白(humantelomeraseassociatedprotein1,hTP1)端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTRT)组成:端粒酶的爬行模型(动画演示)DNA聚合酶复制子链进一步加工端粒及端粒酶的意义体细胞端粒比胚胎细胞端粒短;老化与端粒酶活性下降有关;肿瘤的发生与端粒酶活性有关正常细胞:细胞分裂细胞分裂衰老死亡细胞年轻化端粒酶重新引入抗衰老细胞分裂细胞分裂细胞衰老端粒酶永生化抗肿瘤靶点1、起始2、延长3、终止(注意原核生物与真核生物的不同)DNA复制的一般过程逆转录和其他复制方式ReverseTranscriptionandOtherDNAReplicationWays第四节逆转录(reversetranscription)在逆转录酶的催化下,以RNA为模板合成DNA的过程,又称反转录。逆转录酶一、逆转录病毒和逆转录酶单链DNA结合蛋白SSB作用:复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整模板的DNA总要处于单链状态,而DNA分子只要符合碱基配对,又总会有形成双链的倾向,以使分子达到稳定状态和免受胞内广泛存在的核酸酶降解。拓扑结构——解链过程中,DNA分子会过度拧紧、打结、缠绕、连环等现象。三、拓扑异构酶108局部解链后DNA拓扑异构酶改变DNA超螺旋状态、理顺DNA链。正超螺旋既能水解、又能连接磷酸二酯键拓扑异构酶Ⅰ拓扑异构酶Ⅱ拓扑异构酶分类:拓扑异构酶作用特点:拓扑异构酶Ⅰ切断DNA双链中一股链,使DNA解链旋转不致打结;适当时候封闭切口,DNA变为松弛状态。反应不需ATP。拓扑异构酶Ⅱ切断DNA分子两股链,断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能,连接断端,DNA分子进入负超螺旋状态。(主要)作用机制四、DNA连接酶连接DNA链3?-OH末端和相邻DNA链5?-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。注:连接碱基互补基础上的双链中的单链缺口。DNA连接酶(DNAligase)作用方式:3?5?3?5?解链方向3′5′3′3′5′HO5’3’3’5’DNA连接酶ATP(NAD+)AMP5’3’5’3’在复制中起接合单链缺口的作用。在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。是基因工程的重要工具酶之一。DNA连接酶的功能供核糖3?-OH提供5?-P结果DNA聚合酶引物或延长中的新链游dNTP去PPi(dNMP)n+1连接酶复制中不连续的两条单链不连续→连续链拓扑酶切断、整理后的两链改变拓扑状态DNA聚合酶,拓扑酶和连接酶催化3?,5?-磷酸二酯键生成的比较小结:参与DNA复制的酶和蛋白质DNA聚合酶;DNA解旋酶;拓扑异构酶;引物酶;单链结合蛋白;复制因子等;DNA生物合成过程TheProcessofDNAReplication第三节本节内容1原核生物的DNA生物合成2真核生物的DNA生物合成一、原核生物DNA生物合成(一)复制的起始(二)复制的延长(三)复制的终止1、DNA解链2、引发体的形成并合成引物3、超螺旋的转型(一)复制的起始DnaADnaB、DnaCDNA拓扑异构酶引物酶OHSSB3?5?3?5?引物酶OH5?3?3?5?3?5?引物是由引物酶催化合成的短链RNA分子引物3HO5引物酶含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体.复制起始的过程1.DnaA蛋白辨认结合oriC的重复序列,并与DNA形成复合物,引起局部解链;2.D

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