讲课月季的花药培养.pptVIP

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1、被子植物定义:凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物。 一、被子植物和裸子植物 2、裸子植物定义:凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物。 实例:玉米、大豆、梨、杏 实例:松、杉、柏 当前第1页\共有23页\编于星期五\13点 当前第2页\共有23页\编于星期五\13点 花的结构:花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊 3、花的结构 当前第3页\共有23页\编于星期五\13点 二、被子植物花粉粒的形成 花丝 花药:囊状结构,内有很多花粉粒 1、雄蕊的结构 雄蕊: 当前第4页\共有23页\编于星期五\13点 花粉是花粉母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 2、被子植物花粉的发育 ②花粉粒的形成 花粉母细胞 (小孢子母细胞) 减数分裂 ①经历时期: 四分体时期、单核期、双核期 当前第5页\共有23页\编于星期五\13点 四分体时期 (进入单核期) 有丝 分裂 单核靠边期(小孢子) 单核居中期(小孢子) 小孢子 (单核花粉粒) 当前第6页\共有23页\编于星期五\13点 精子 精子 有丝 分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 生殖细胞 营养细胞 双核期 两个精子和一个营养核的基因型相同 当前第7页\共有23页\编于星期五\13点 1个花粉母细胞 4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 2n n n n n 当前第8页\共有23页\编于星期五\13点 四、产生花粉植株的两条途径 五、影响花药培养的因素 1、材料的选择 没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 当前第9页\共有23页\编于星期五\13点 不同植物的诱导成功率很不相同,就同一种植物来说亲本的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 ②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体,花粉发育的过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。 选材是否成功是花药培养成功的关键。 ①选材 当前第10页\共有23页\编于星期五\13点 一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养的成功率最高。即:最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。 选择单核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎; 选择单核期之后的花药接种,花瓣已有些松动,又给材料的消毒带来困难,且难以挑选到单核期的花药。 ③花药培养时期的选择 ④其它时期选择的缺点 当前第11页\共有23页\编于星期五\13点 为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花,都不宜选作实验材料。 ⑥选择完全未开放花蕾的原因 完全未开放的花蕾,可挑选到单核期的花药,菌少、易消毒 ⑤单核期花药的挑选 当前第12页\共有23页\编于星期五\13点 (二)、材料的消毒: 花 蕾 (70%酒精) 大约30s (无菌水) 清洗 (无菌吸水纸) 吸干水分 (1%氯化汞溶液) 2~4min (无菌水) 冲洗 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同? 在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 ;消毒时间不同。 当前第13页\共有23页\编于星期五\13点 ⑦为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难? 花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。 ⑦花药培养时间 一般月季的花药培养时间选在5月初到5月的中旬,即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及生理状态会比较好,可提高花粉的诱导成功率。 当前第14页\共有23页\编于星期五\13点 月季花药培养时的花粉粒最好是( ) A、四分体时期 B、单核居中期 C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒 C 2、培养基: 花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同而有所变化小麦为N6培养基,马铃薯、月季为MS培养基,油菜为B5培养基。 当前第15页\共有23页\编于星期五\13点 3、其他因素 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响 六、实验操作 (一)材料的选取 ②某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 ①最常用的方法有醋酸洋红法 1、方法 当前第16页\共有23页\编于星期五\13点 ①醋酸洋红法染色机理 醋酸洋红为碱性染色剂,而花粉细胞内有染色体,染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。 将体积分数45%的醋酸100ml煮沸,缓缓加入1g洋红,再加热回流8h,冷却至50℃,过滤即可。 ②醋酸洋红的配置 2、醋酸洋红法 当前第17页\共有23页\编于星期五\13点

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