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Chapter 2微生物发酵产酶;酶的生产方法;Go 1、酶生物合成过程分析;酶生物合成过程;八中心法贝I]-Central Dogma;■ Replication 复制:;2、RNA的生物合成(转录)- Transcription 细胞内RNA的生物功能;转录过程 ■起始位点的识别recognition ■车专录起女台initiation ■链的延伸elongation ■转录终止termination ■转录后加工modification;DNA;3、蛋白质的合成(B#)-Translation;蛋白质的合成过程 ■肽链合成的起始initiation ■肽链合成的延伸elongation ■肽链合成的终止与释放termination and release ■合成多肽的输送和加工transport and modification ■蛋白质分子的折叠folding;蛋白质的折叠;4、酶生物合成的调节(regulation);细胞内酶的调控模式;■酶在细胞内的含量取决于酶的合成速度和分解速度。细胞 根据自身活动需要,严格控制细胞内各种酶的合理含量, 从而对各种生物化学过程进行调控。;酶合成诱导的现象;酶合成阻遏的现象: 实验现象:;乳糖操纵子的结构;诱导机制:乳糖的诱导作用;色氨酸操纵子(酶的阻遏) ----------阻遏物和操纵基因的调节;过去称葡萄糖效应;2. 2常见产酶微生物;(1)大肠杆菌 ■形态:短杆或长杆状,0.5~1.OX 1. 0~3.0 um,革兰氏阴性,运动 (周毛)或不运动,无芽抱,-般无荚膜。菌落呈白色至黄白色,扩展, 光滑,闪光。 -Escher i ch属菌株和大多数大肠杆菌是无害,但也有些大肠杆菌是致 病的,会引起腹泻和尿路感染。 ■大肠杆菌的名声主要因它易于在实验室操作、生长迅速,而且营养要 求低。 .应用: rjoci n .com;(2)醋酸杆菌 QAcetobacter};(3)枯草芽砲杆菌(Bacillus subtil is);(4)根霉(Rhizopu^);(5)曲{Aspergillus);2.3酶的发酵工艺条件与控制;1、培养基;培养基的设计原则;培养基必须具备微生物生长所需要五大营养要素;水;氮源;生长因子 生长因子是指某些微生物不能用普通的碳源、氮源物质进 行合成,而必须另外加入少量的生长需求的有机物质。 分类: 化学结构分成维生素、氨基酸、卩票吟(或卩密嗟)及其衍 生物和类脂成分等四类;实验室的常用培养基: 细菌: 牛肉膏蛋白豚培养基(或简称普通肉汤培养基); 放线菌:高氏1号合成培养基培养; 酵母菌:麦芽汁培养基;;■枯草杆菌BF7658a-淀粉酶发酵培养基:玉米粉8%,豆饼;■游???放线菌葡萄糖异构酶发酵培养基:糖蜜2%,豆饼粉;2、发酵条件及控制;温度的控制;溶解氧的控制;3、提咼酶戸量的措施 ?添加诱导物;诱导物一般可以分为3类 酶的作用底物:纤维素、纤维糊精(纤维素酶); 乳糖(B一半乳糖昔酶); 淀粉(淀粉酶); 酶的催化反应产物:半乳糖醛酸(果胶酶); 纤维二糖(纤维素酶); 没食子酸(单宁酶) 作用底物的类似物:蔗糖甘油单棕梱酸(蔗糖酶), 异丙基硫代半乳糖昔(8—半乳糖昔酶);?控制阻遏物的浓度;?控制阻遏物的浓度;?添加表面活性剂;?添加产酶促进剂;2.4酶生产过程的动力学;1、酶生物合成的模式;1.1同步合成型;同步合成型 酶的生物合成与细胞生长同步进行的一种酶生物合成 模式。该类型酶的生物合成速度与细胞生长速度紧密联系, 又称为生长偶联型。 属于该合成型的酶,其生物合成伴随着细胞的生长而 开始;在细胞进入旺盛生长期时,酶大量生成;当细胞生 长进入平衡期后,酶的合成随着停止。 大部分组成酶的生物合成属于同步合成型,有部分诱 导酶也按照此种模式进行生物合成。;1.2延续合成型;延续合成型;1.3中期合成型;中期合成型;1.4滞后合成型;滞后合成型;1.5理想的酶合成模式;优化酶合成模式的几点思路;2、酶生产过程中细胞生长动力学;莫诺德方程的修正:;3、产酶动力学;与生长部分相关;常用的几种模型;思考题
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