生物化学第一章蛋白质.pptxVIP

蛋白质(Protein);第一节概 述;1.蛋白质是生物体内必不可少的重要成分;3.外源蛋白质有营养功能，可作为生产加工的对象. 三、蛋白质的组成 1 .元素组成 蛋白质是一类含氮有机化合物，除含有碳、氢、氧外，还有氮和少量的 硫。某些蛋白质还含有其他一些元素，主要是磷、铁、碘、碘、锌和铜等。这 些元素在蛋白质中的组成百分比约为： 「碳 50% 氢7% J 氧 23% 氮 16% 硫 0—3% I其他微量;氮占生物组织中所有含氮物质的绝大部分。因此，可以将生物组织 的含氮量近似地看作蛋白质的含氮量。由于大多数蛋白质的含氮量接近 于16%,所以，可以根据生物样品中的含氮量来计算蛋白质的大概含量 ★蛋白质含量的测定：凯氏定氮法 （测定氮的经典方法） 优点：对原料无选择性，仪器简单， 方法也简单； I缺点：易将无机氮（如核酸中的氮） 都归入蛋白质中，不精确。 一般，样品含氮量平均在16%,取其倒数100/16=6.25,即为 蛋白质换算系数，其含义是样品中每存在lg元素氮，就说明含有 6.25g蛋白质）；故： ※蛋白质含量=氮的量X 100/16X6.25;除了上法外，还有 「紫外比色法 丿双缩脈法 Folin-酚 I考马斯亮兰G-250比色法 （条件：蛋白质必须是可溶的）;第二节;2 .常见氨基酸的分类 「中性AA （1）按R基团的酸碱性分〈酸性AA 〔碱性AA;JU;5 .几种重要的不常见氨基酸 在少数蛋白质中分离出一些不常见的氨基酸，通常称为不常见蛋白质 氨基酸。这些氨基酸都是由相应的基本氨基酸衍生而来的。其中重要的有 牛羟基脯氨酸、5-羟基赖氨酸、N■甲基赖氨酸、和3,5?二碘酪氨酸等。这 些不常见蛋白质氨基酸的结构如下;4 .羟基脯氨酸;二.氨基酸的重要理化性质;_ 10.000;2.氨基酸的离解性质 ■氨基酸在结晶形态或在水溶液中，并不是以游离的梭基或氨基形式存在, 而是离解成两性离子。在两性离子中，氨基是以质子化(-nh3+)形式存在, 後基是以离解状态(-C00 )存在。 ■在不同的pH条件下，两性离子的状态也随之发生变化;3 .氨基酸的等电点 当溶液浓度为某一pH值时，氨基酸分子屮所含的?NH3+和?C00-数目正好相等，净电荷为0。这一pH值即为氨基酸的等电点，简称pl。 在等电点时，氨基酸既不向正极也不向负极移动，即氨基酸处于两性 离子状态。 侧链不含离解基团的中性氨基酸，其等电点是它的pKl和pK2的 算术平均值：pl = (pKl + pKz2 )/2 同样，对于侧链含有可解离基团的氨基酸，其pl值也决定于两性 离子两边的值的算术平均值。 酸性氨基酸:pl = (pKl + pKR-COO- )/2 磴性氨基酸:pl = (pK2 + pKR-NH2 )/2;醛;開;COQ^;DNFB 2斗二硝基氟苯;★首先由Sanger应用，确定了快岛素的一级结构 A. 肽分子与DNFB反应，得DNP■肽 B. 水解DNP-肽，得DNP-N端氨基酸及其他游离氨基酸 C. 分离DNP-氨基酸 D?层析法定性DNP?氨基酸，得出N端氨基酸的种类、数冃 (4)与异硫氧酸苯酯(PITC)的反应 ■由Edman于1950年首先提出 ■为a- MH?的反应 -用于N末端分析，又称Edman降解法;■ Edman （苯异硫割酸酯法）氨基酸顺序分析法实际上也是一种N-端分 析法。此法的特点是能够不断重复循环，将肽链卜端氨基酸残基逐一;.肽链（N端氨基酸）与PITC偶联，生成PTC-肽 .环化断裂：最靠近PTC基的肽键断裂，生成PTC■氨基酸和少;- 用Edman降解法提供逐次减少- - 灵敏度提高，能连续测定。 ■ 多肽顺序自动分析仪 ■ 样品最低用量可在5pmol;第三节 蛋白质的分子结构;Ser;2 .肽键;3 .天然存在的重要多肽 ?在生物体中，多肽最重要的存在形式是作为蛋白质的亚单位。 ?但是，也冇许多分子量比较小的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都 具有特殊的生理功能，常称为活性肽。 ?如：脑啡肽：激素类多肽：抗生素类多肽：谷胱甘肽：蛇毒多肽等。;+H 3 N - Tyr- Gly- Gly-Ph e- M e t-C O 0_ +H3 N - Tyr- Gly- Gly-Ph e- Leu-C O O;二?蛋白质的一级结构 革 1 .蛋白质的一级结构(Primary 1 啊 structure)包括： I ⑴组成蛋白质的多肽链数目? V 二 (2)多肽链的氨基酸顺序， / 0==^ 公 ⑶多肽链内或链间二硫键的数目和如 ff移尸