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2020人教高考生物一轮非选题基本选练题四含参考答案 （一）奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。研究人员利用PCR 技术扩增了目的 基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合如图回答: (1)利用PCR 技术扩增目的基因的原理与细胞 DNA 复制类似(如图1 所示)。图 中引物为单链DNA 片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,第四轮循环产 物中含有引物A 的DNA 片段所占的比例为________,PCR 扩增技术反应体系的主 2+ 要成分应包含:扩增缓冲液(含ATP 和Mg )、水、4 种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、 引物和________。 (2)为了食品安全,图2 所示的表达载体需用________酶切除抗性基因的部分片 段,再用________酶使表达载体重新连接起来。选用缺失URA3 基因的酵母菌作为 受体细胞(必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活),为了筛选出成功导入表达载 体的酵母菌,所使用的培养基________(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。 (3)测定凝乳酶基因转录的mRNA 序列,测得从起始密码子到终止密码子之间的序 列为1 201 个碱基,经判断这段序列的测定是错误的,为什么? _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ ______________________________________________________________。 【解析】(1)由图1可以知道,由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA 分子中, 只含有引物A 或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA 分子时,两种引物都 含有,故第四轮循环共产生16个DNA 分子,其中含有引物A 的是15 个,占15/16。 2+ PCR 扩增技术反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含ATP 和Mg )、水、4 种 脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和TaqDNA 聚合酶。 (2)根据图2 显示ApaL Ⅰ酶切位点在氨苄青霉素抗性基因中,因此可以采用 ApaL Ⅰ酶切除抗性基因的部分片段,再用DNA 连接酶使表达载体重新连接起来。 因为缺失URA3 基因的酵母菌必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活。重组质粒 中含有URA3 基因。为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,即所使用的培养基不 需要添加尿嘧啶,如果能存活,说明导入成功;如果不能存活,说明没有成功。 (3)因为生物决定每个氨基酸的碱基序列为三联密码,所以基因转录的mRNA 序列 应为3 的整倍数。从起始密码子到终止密码子之间的序列为1 201 个碱基,不是 3 的整倍数,因此可以判断这段序列的测定是错误的。 答案:(1)15/16 TaqDNA 聚合酶 (2)ApaLⅠ DNA 连接 不需要 (3)因为生物决定每个氨基酸的碱基序列为三联密码,所以基因转录的mRNA 序列 应为3 的整倍数 （二）【微生物的培养与应用】 硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基 苯酚的细菌。请回答下列有关问题： （1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择_______(硝 基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的 原因是 。 （2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是__________________。划线的某个平 板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一 条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的 可能原因是________________ （答一点即可）。 （3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有____mL 的无菌水中； 常用_______法进行活菌计数，其原理是_____________________，但统计的菌落 数往往___________ （填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是 __________________________。 （4）实验数据显示，当培养基中加入碳