宫颈癌Hela细胞中HIF2α基因的表达及相关研究.docx

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本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有 权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论 文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文; 学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。 作者签名:二匿L导师签名:凄丝。良日期:上年—生月jL日 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 中文摘要 宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤,其病死率在所有妇女癌症病 死率中占第二位。近年来宫颈癌发生率逐渐增多,且发病年龄越来越 年轻化。宫颈癌的诊断方法与步骤已经基本完善,但宫颈癌的治疗还 在不断改进之中。宫颈癌的治疗目前一直维持在一个手术、化疗、放 疗综合治疗的局面,治疗效果没有显著改善。特别是晚期宫颈癌患者, 治疗效果不理想,生活质量低,而且近年来又出现放疗抵抗,化疗耐 药等使得宫颈癌的治疗处于瓶颈阶段。如何治疗宫颈癌,有效的改善 疗效,提高患者的治愈率及生活质量已经成为宫颈癌研究中最关键的 问题之一。 随着科学技术的发展,近年来多种肿瘤的治疗已经进入到分子治 疗水平,少数针对有效靶基因的治疗已经被运用到部分肿瘤的临床研 究中,而宫颈癌的基因治疗却一直停滞于基础研究阶段。肿瘤的发生 发展是一个由多种基因共同作用的复杂过程,而微环境的改变使得各 种基因表现出不同作用从而使得这个过程更加复杂。找到有效的基 因,研究其在微环境中的变化,从而探讨该基因对于肿瘤的作用是我 们需要研究的第一步。是否能对该基因进行有效干扰是该基因能否运 用于临床治疗的前提。本研究希望能从肿瘤所存在的微环境出发,找 到一个有效的靶基因,并能对该靶基因进行有效干扰,最终希望能通 过对该基因进行干扰使宫颈癌的生物学行为发生改变,从而为临床中 宫颈癌治疗或提高宫颈癌治疗的疗效提供依据。 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 宫颈癌是人体内的一种实体肿瘤。研究发现在宫颈癌患者中宫颈 组织的P02低于正常宫颈组织,而且随着宫颈癌期别的增加,P02的 水平降低Ⅲ。简而言之,宫颈癌组织中存在缺氧微环境。研究表明缺 氧微环境在多种肿瘤的形成与发展过程中发挥重要作用,参与到肿瘤 细胞的代谢适应、凋亡抵抗、血管生成和侵袭、转移等各个方面。缺 氧微环境对于肿瘤细胞的作用通过缺氧诱导因子家族(ⅢF)实现。 目前已知的缺氧诱导因子包括HIF.1,HIF一2和HIF.3。每个因子都由 不同的功能亚基和相同的结构亚基组成。HIF.2a是HIF.2的功能亚 基,于1997年发现,是近年来发现的最重要的缺氧诱导因子之一, 目前研究较少,但已引起国内外医学研究者的广泛重视,相关研究正 在不断展开。已经有研究证实HIF.2a基因与肺癌,肾癌等关系密切, 并且在这些肿瘤中HIF.20r基因所发挥的独特作用是其他缺氧诱导因 子所无法替代的12,31。还有研究指出HIF.2a基因表达具有组织特异性, 并受周围环境影响【4】。此外,HIF.2a基因还被发现在放疗抵抗眨6’2刀, 化疗耐药吃81中发挥了重要的作用,从而被认为对于肿瘤的治疗有重 要意义。HIF.2a基因在宫颈癌中是否表达,其表达与是否受微环境 影响?HIF.2a基因能否被有效干扰?以及HIF.2a基因对宫颈癌的生 物学行为是否有影响,微环境是否在这些影响中起作用?HIF.2a基 因的靶基因有哪些,微环境是否对它的作用产生影响?这些问题在国 内外未见相关研究报道。 本研究首先就宫颈癌Hela细胞株中HIF.2a基因的表达情况进行 研究,并通过RNAi技术对HIF.2a基因进行干扰,找出最佳干扰靶 II 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 点,对Hela细胞中的HIF.2a进行有效干扰后了解其相关基因的表达 情况,以探讨HIF.2a在宫颈癌Hela细胞中的作用机制。最后将Hela 细胞中HIF一2a进行有效干扰后再进行肿瘤相关基因检测和细胞克隆 及细胞侵袭实验,以探讨HIF.2a对于Hela细胞生物学行为的影响。 通过本实验希望能为临床治疗宫颈癌提供新的思路和方法。 Ul 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 第一部缺氧及常氧条件下宫颈癌I-lela细胞培养及I-IIF.2a表达水 平的研究 目的: 本研究通过对常氧及缺氧条件下宫颈癌Hela细胞的增殖情况及 HIF.2a的表达情况进行检测。拟探讨与常氧相比,缺氧条件下Hela 细胞的生长情况及HIF.2a mRNA的表达水平的改变趋势。 方法: 检测

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