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密级: 密级: 论文编号: 中国农业科学院 学位论文 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶 特性的影响研究 The Effect of Diclazuril on the Characterization of Lactate Dehydrogenase of Eimeria tenella 硕士研究生.李莎 指导教师:黄兵研究员 申请学位类别:兽医硕士 专业领域名称:兽医 培养单位:上海兽医研究所 研究生院 2015年5月 万方数据 IIlllll IIlllll IlllJJlU II HI Illll fillf Y2787456 Secrecy: No. Chinese Academy of Agricultural Sciences Dissertation The Effect of Diclazuril on the Characterization of Lactate Dehydrogenase of Eimeria tenella M.S.Candidate:Sha Li Supervisor:Prof.Bing Huang Degree:Master of Veterinary Science Specialty:Veterinary Medicine May 2015 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了 明确的说明并表示了谢意。 研究生虢库矽 帆挑年加仁日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科 学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不 同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 研究生签名 :鸯药 时间: 硼』f年占月弘日 / 导师签名: —参鲁 时间: 7秒厂j锋勿月蟛日 万方数据 中国农业科学院 中国农业科学院 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 论文题目 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶特性的影响研究 论文作者 李莎 专业领域 兽医 研究方向 不区分研究方向 指导教师 黄兵 培养单位(研究所、中心) 上耀飘 /‘童 姓名 职称 单 位 专业 /≮≥ ,q萋爹鹬 卜;≮ 评 盲评 4 , ≮ 0、撼,∥ \ / 阅 盲评 | | / 人 盲评 l | | | 答 辩 秽勃彳毒 主 程训佳 教授 复旦大学 预防兽医学 席 朱建国 教授 上海交通大学 预防兽医学 砖厶冈 林矫矫 研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 竹咏专 答 傅志强 研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 f孽志强 辩 金亚美 研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 合他孳\ 委 口 贝 会议记录(秘书) 顾惠明 论文答辩时问地点 2015年5月27日,上海兽医研究所 万方数据 摘要柔嫩艾美耳球虫(Eimeria 摘要 柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,Et)是隶属于顶器复合门(Apicomplexa)艾美耳属的一 种胞内寄生性原虫,可引起鸡急性盲肠球虫病,严重时可致鸡只死亡。目前球虫病的控制主要依 赖抗球虫药物预防。地克珠利是一种三嗪类化合物,具有高效、低毒、广谱的抗球虫效力,但若 长期使用或使用不当,会出现耐药性。要防止或延缓耐药性的发生,以及研制新的有效药物,就 必须了解该药抗寄生虫的分子作用机制,确定其靶标分子。至今,关于地克珠利抗球虫的分子作 用机制还不清楚。乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)是糖酵解途径的末端酶,能够催化 丙酮酸与乳酸之间可逆的氧化还原反应,大多数体内寄生虫依靠此途径获取能量维持生存。研究 表明,E tenella地克珠利敏感株LDH(sEtLDH)与耐药株LDH(rEtLDH)的同工酶谱存在明显 差异,提示EtLDH与地克珠利抗球虫作用机理存在一定联系。本研究通过sEtLDH与rEtLDH特 性的差异比较、地克珠利对E tenella孢子生殖及裂殖生殖过程中LDH的影响研究,为揭示地克 珠利的分子作用机理及寻找潜在的药物靶标奠定了重要基础。 1.EtLDH单克隆抗体的制各及其在蛋白定位中的应用 用大肠杆菌表达的重组E儿DH可溶性蛋白免疫BALB/c小鼠,经5次免疫后取脾脏制备免 疫脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELlS
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